免疫反应造成的肝脏损伤是病毒性肝炎，药源性肝损伤和自身免疫性肝炎共同的发病机制。T淋巴细胞和巨噬细胞是免疫性肝损伤最主要的效应细胞。黄芩甙是传统保肝中药黄芩的主要活性成分，目前在临床上用于辅助治疗急慢性肝炎。本研究利用T淋巴细胞介导的刀豆蛋白A(Con A)自身免疫性肝炎和巨噬细胞介导的内毒素性肝损伤评价了黄芩甙防治免疫性肝损伤的药理活性。在此基础上，机理研究着重于黄芩甙对脂多糖刺激下小鼠腹腔巨噬细胞活化及刀豆蛋白A刺激下的原代培养脾脏淋巴细胞活化的抑制作用及对肿瘤坏死因子(TNF-α)导致的原代培养肝实质细胞凋亡的保护作用。本研究旨在考察黄芩甙对免疫性肝损伤的保护作用及探讨其保护机理。　　 体内实验分为二部分：一，黄芩甙保护刀豆蛋白A诱导的自身免疫性肝炎。本部分体内实验结果表明，24小时提前三次预防性给予黄芩甙(200mg/kg和100mg/kg)有效地减轻20mg/kg Con A诱发的小鼠急性肝损伤，表现为降低血清中的转氨酶含量，改善肝脏组织的炎细胞聚集，肝细胞凋亡，坏死等病理改变。进一步的研究结果表明：(1)黄芩甙预防性给药降低血清中的Th1型细胞因子TNF-α，IFN-γ，IL-6的水平，但是对Th2型细胞因子IL-10没有影响。体外实验结果也与体内相一致，10-100μg/ml黄芩甙是能够显著地抑制ConA刺激下的原代脾淋巴细胞分泌TNF-α和IFN-γ；(2)黄芩甙预防性给药降低肝脏组织中髓过氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)和脂质过氧化物的含量，增强抗氧化酶超氧化物歧化酶(SOD)的水平；(3)降低肝脏组织中的凋亡执行酶caspase3的活性及活性片断的含量；(4)黄芩甙不是通过抑制Fas/FasL系统的表达起到保护作用。　　 二，黄芩甙对内毒素性肝损伤的预防作用。24小时提前三次预防性给予黄芩甙(100mg/kg)有效地减轻内毒素性肝损伤，表现为延长小鼠的存活时间，提高存活率，显著降低血清中的转氨酶和胆红素水平，减轻肝脏的出血性坏死和微循环障碍，降低血清中的TNF-α及一氧化氮(NO)含量。　　 鉴于巨噬细胞是内毒素进入循环系统的首要效应细胞以及巨噬细胞活化在内毒素性肝损伤中的重要作用，本论文第三部分考察了黄芩甙对脂多糖(LPS)刺激小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7细胞分泌炎性介质的抑制作用。实验结果表明，(1)1-25μg/ml的黄芩甙可以有效地抑制脂多糖或干扰素—γ(IFN-γ)刺激下诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)的表达及一氧化氮的产生，但是不影响iNOS酶的活性。(2)10-50μg/ml黄芩甙可以抑制LPS刺激下TNF-α的产生；(3)1-25μg/ml黄芩甙可以抑制前列腺素(prostaglandin E2，PGE2)和血栓烷(thromboxane A2，TXA2)的产生但是不能降低环氧合酶-2(cyclooxygenase-2，COX-2)的表达；(4)1-25μg/ml黄芩甙可以抑制LPS刺激下内皮素(endothelin-1，ET-1)的产生；(5)0,1-25μg/ml黄芩甙可以显著抑制氧自由基(Reactive oxygen species，ROS)的生成，提高细胞内的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)含量。抑制炎症介质产生的机理研究表明，10-25μg/ml的黄芩甙可以抑制IFN-γ刺激下的干扰素调节因子(interferon regulatory factor，IRF-1)的表达及其调控因子stat-1的磷酸化，抑制LPS刺激下的p38和JNK的磷酸化；尽管黄芩甙表现出较强的抗氧化活性，但是黄芩甙对核因子-κB(nuclear factor-κB，NF-κB)的活化及抑制性蛋白-κB(inhibitor protein-κB，I-κB)的降解没有作用。　　 暴发性肝细胞凋亡是免疫性肝损伤的主要病理改变，抑制肝细胞凋亡是防治免疫性肝损伤重要手段之一。本论文第四部分利用TNF-α/Act D导致的原代培养肝细胞凋亡的体系研究黄芩甙保护肝细胞的作用。结果表明，(1)0.2-20μg/ml的黄芩甙对TNF-α/Act D导致的肝细胞损伤有明显的保护作用：细胞存活率的增加；培养液上清中的转氨酶含量降低；凋亡相关酶caspase3，8，9的活性降低，活性片断减少，说明BA抑制了肝细胞凋亡；(2)黄芩甙不是通过降低肝细胞膜上的TNF受体表达来起到保护肝细胞作用；(3)黄芩甙可以通过增加细胞内的SOD活性来降低活性氧自由基(reactive oxygen species，ROS)水平进而抑制JNK的磷酸化。此外，黄芩甙还可以显著减轻四氯化碳对肝细胞的脂质过氧化损伤，表现在提高肝细胞的存活率，降低细胞的脂质过氧化水平和提高细胞内的谷胱甘肽(glutathione，GSH)含量。　　 综上所述，可以得出如下结论：黄芩甙具有一定的保护免疫性肝损伤的作用，其作用机制与抑制免疫细胞过度激活和保护肝细胞损伤相关。本研究结果可以为临床应用黄芩甙治疗肝脏疾病提供参考。