脑缺血时干扰素γ与细胞间粘附分子-1表达的相关性研究

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目的:ICAM-1 作为细胞粘附分子中免疫球蛋白超家族成员之一,通过与炎性细胞表面同族型配体之间相互作用形成粘附,在免疫监督、炎症反应、吞噬过程、动脉粥样硬化等过程中起着重要的作用。研究显示脑缺血时脑微血管内皮细胞上 ICAM-1 的表达增高,从而诱导了中性粒细胞的粘附和迁移,导致炎症反应的发生而加重了脑损伤。IFN-γ主要由活化 T 细胞产生。当抗原、PHA 或 ConA 刺激后 T 细胞分泌 IFN-γ,通常与 IL-2 的产生相一致。目前认为巨噬细胞活化因子的主要活性存在于 IFN-γ中。此外,活化 NK 细胞也可产生 IFN-γ。研究表明 IFN-γ可上调许多细胞 ICAM-1的表达,应用细胞培养的研究方法显示肺成纤维细胞、肺泡上皮细胞、基底细胞癌细胞、黑色素瘤细胞等在 IFN-γ的刺激下 ICAM-1 的表达上调。本文旨在研究脑缺血时 IFN-γ与 ICAM-1 的表达是否具有相关性,即脑缺血时 IFN-γ是否也是影响 ICAM-1 表达的一个因素。 方法:雄性 SD 大鼠(200~250g)54 只,随机分成 6 组,各组再随机分成实验组 6 只,对照组 3 只。用埋线法制造大鼠局灶脑缺血/再灌注模型,即颈正中切口,暴露右 CCA 分叉,将直径 0.26mm 的钓鱼线从 ECA 逆插法栓入 ICA,感到有阻力时停止,深度约(18.5+0.5)mm。埋线 1 h 后拔出予以再灌。对照组施行假手术,即仅暴露右 CCA 分叉,不做进一步处理。分别于再灌后 1、3、6、9、12、24 h 处死动物,取大脑组织经多聚甲醛固定,梯度酒精脱水,二甲苯透明,石蜡包埋。经轮转式切片机连续切片,厚度为 5um,应用免疫组化方法分别检测 IFN-γ及 ICAM-1 的表达:切片脱蜡至水,3%过氧化氢阻断内源性过氧化物酶,微波加热修复抗原,分别滴加羊抗大鼠 IFN-γ单抗、小鼠抗大鼠 ICAM-1 单抗,37℃温箱孵育 1 h,再分
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