1目的通过小鼠B₁₆黑色素移植瘤模型,观察三七提取活性成分Rh₂、Rg₃抗肿瘤效应,并从影响肿瘤血液供应角度探讨其可能的作用机制。2方法（1）建立小鼠B₁₆黑色素移植瘤模型,随机分9组给药:①模型组;②CTX组;③Rh₂大剂量组;④Rh₂中剂量组;⑤Rh₂小剂量组;⑥Rh₂+Rg₃组;⑦Rg₃大剂量组;⑧Rg₃中剂量组;⑨Rg₃小剂量组。用药10天,实验过程中动态观察小鼠整体状况、体重以及死亡情况。第15天眼球取血放射免疫法测定白介素-2（IL-2）、肿瘤坏死因子（TNF）水平;脱颈处死小鼠,摘除胸腺、脾称重,计算免疫器官脏器指数;剥离肿瘤称重,计算抑瘤率。（2）小鼠B₁₆黑色素移植瘤模型随机分6组给药:①模型组;②Rh₂组;③Rh₂+Rg₃大剂量组;④Rh₂+Rg₃中剂量组;⑤Rh₂+Rg₃小剂量组;⑥Rg₃组。用药10天,第15天脱颈处死小鼠,剥离肿瘤,10%甲醛固定肿瘤组织,石蜡包埋。HE染色光镜下观察肿瘤组织形态。采用免疫组化与组织化学双重染色法检测血管生成拟态:①使用内皮细胞标记物CD31和PAS双重染色;②黑色素瘤特异性标记物S-100和PAS双重染色。免疫组化法检测肿瘤血管生成相关基因VEGF、EphA2、Laminin、MMP-2、VE-cadherin的表达。3结果（1）所有实验小鼠均存活。实验过程中发现模型组、CTX组小鼠一般状态逐渐下降,进食量明显减少,鼠体渐消瘦,且毛色逐渐变得缺乏光泽,并有脱毛、行动迟缓等现象,尤以CTX组更加明显。Rh₂、Rg₃各剂量组与模型组、CTX组比较,整体状况良好。剥离肿瘤时发现模型组肿瘤呈浸润性生长,肿瘤血管丰富,包膜不易剥离;其余各组瘤体包膜相对比较完整,血管相对较少,易于剥离完整瘤块,尤其以Rh₂各剂量组和Rh₂、Rg₃联合用药组明显。（2）与治疗前比较,模型组、CTX组小鼠体重明显下降,脏器指数明显减低,血清IL-2和TNF水平下降,尤以CXT组更为明显,各实验组小鼠体重增加,Rh₂、Rg₃单用及联合用药均能明显提高外周血中IL-2、TNF-α的含量,以联合用药组最为显著,且能够提高荷瘤小鼠免疫器官重量,与对照组比较差异显著。（3）三七提取活性成分Rh₂、Rg₃各剂量组均能抑制小鼠B₁₆黑色素瘤生长,平均瘤重与模型组比较有统计学意义（P＜0.05）。尤其是Rh₂大、中剂量组,Rg₃大剂量组和Rh₂、Rg₃联合用药组,抑瘤率分别为35.5%,30.1%,33.6%和38.6%。Rg₃大、中剂量组抑瘤效果低于Rh₂相应剂量组。（4）与模型组比较,三七活性成分Rh₂、Rg₃单独用药及联合用药各组肿瘤血管生成拟态密度（VMD）以及内皮依赖性微血管密度（MVO）均有降低,CD31和S-100的表达下调,以各联合用药组更为明显。（5）模型组肿瘤组织高表达VEGF、EphA2、MMP-2及VE-cadherin、Laminin;三七活性成分Rh₂、Rg₃各实验组均能明显下调VEGF、EphA2、VE-cadherin、MMP-2的表达。以Rh₂、Rg₃联合用药组更显著,与模型组比较,差异有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）。4结论1.三七活性成分Rh₂、Rg₃对小鼠B₁₆黑色素瘤生长有明显的抑制作用而没有明显毒副作用,能够改善小鼠整体状况而不降低小鼠体重,不抑制荷瘤小鼠免疫功能,表明其能在抗肿瘤同时提高荷瘤小鼠的生活质量。2.三七活性成分Rh₂、Rg₃能显著抑制小鼠B₁₆黑色素瘤血管生成拟态及内皮依赖性新生血管的形成,从而有效地阻断肿瘤血液供应。3.三七活性成分Rh₂、Rg₃抑制小鼠B₁₆黑色素瘤血管生成拟态的机制可能是通过阻止EphA2的活化,下调MMP-2及VE-cadherin的表达,从而抑制Laminin的表达及水解有关;其抗肿瘤内皮依赖性新生血管的机制可能与下调VEGF、MMP-2的表达有关。4.抑制肿瘤VM及内皮依赖性血管的形成可能是三七活性成分Rh₂、Rg₃抗肿瘤机制之一。5.三七活性成分Rh₂、Rg₃联合用药抗肿瘤血液供应及抗肿瘤效应更显著。