鬼臼多糖分离提取及免疫药理作用研究

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鬼臼是我国传统的中药,它具有多方面的药理作用和生物活性。本试验对鬼臼多糖(PEP)进行提取和分离纯化、并通过实验研究探讨了鬼臼多糖的药理活性。主要研究如下:鬼臼经过脱脂、去色素后用水煮醇沉方法获得粗多糖。粗多糖中不含淀粉、也无蛋白质存在,用苯酚—硫酸法测定所提取的多糖含量为79.1%。精制后的多糖采用红外光谱扫描表现出多糖的特征吸收峰,分别为3412.47cm-1,2928.50cm-1,1648.25cm-1,1560.28cm-1,1368.97~1456.81cm-1,929.70cm-1和850.37cm-1;层析法证明鬼臼多糖主要由葡萄糖、果糖、甘露糖和阿拉伯糖组成。通过体外细胞增殖试验、RT-PCR、环磷酰胺免疫抑制模型和地塞米松氧化应激模型,观察鬼臼多糖对脾脏指数、胸腺指数、IFN-γ、一氧化氮、过氧化氢、超氧阴离子水平等的影响,探讨了活性氧在鬼臼多糖免疫调节中的作用。结果表明:鬼臼多糖以200mg/kg体重的剂量分别于1,3,5,7d对小鼠灌服,可明显提高脾脏指数,但对胸腺指数影响不明显。采用50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml终浓度的鬼臼多糖与脾脏淋巴细胞混合培养,用MTT法测定细胞增殖,证明鬼臼多糖对淋巴细胞增殖有促进作用,与ConA配合使用效果更佳,鬼臼多糖与过氧化氢配合使用也能促进脾脏淋巴细胞增殖。采用RT-PCR法检测鬼臼多糖对细胞因子IFN-γ基因表达的影响,发现鬼臼多糖对IFN-γ因子的含量有升高作用。用地塞米松建立氧化应激模型,腹腔注射鬼臼多糖(200mg/kg),结果显示鬼臼多糖对胸腺中的GSH有升高作用,能降低脾脏中NO含量,对正常小鼠脾脏中总超氧化物歧化酶的活力没有显著影响、能降低小鼠血浆中脂质过氧化、能提高小鼠血浆中总抗氧化能力、鬼臼多糖对抑制羟自由基(·OH)的能力无明显影响、能降低小鼠脾脏过氧化氢含量、提高由地塞米松所致氧化应激小鼠抗超氧阴离子能力。结论:鬼臼多糖在体外可显著促进淋巴细胞的增殖,体内通过增强免疫器官功能实现免疫调节作用;鬼臼多糖在体内有广泛的抗氧化作用;鬼臼多糖通过免疫调节作用和影响自由基的水平、减轻氧化损伤程度实现免疫调节的生物活性。
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