转基因草莓向栽培草莓中转移CBF1基因的研究

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cclongman
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本实验于2004年9月-2007年3月在北京市农林科学院林业果树研究所进行。以“丰香”、“土特拉”、“达斯莱克特”、“童子1号”、“枥乙女”为母本,以转CBF1基因的“哈尼”转基因株系80、83、94、104、10-5-5为父本,获得以下主要结果:1不同质量浓度的卡那霉素对种子的萌发影响不大,但对其生长发育具有明显的抑制作用,随着质量浓度的增加,其抑制作用加强。获得的筛选培养基为MS+Km25mg/L。2经过卡那霉素筛选出的阳性植株经PCR检测,证明外源基因CBF1通过有性杂交可以从转基因植株当中转移到普通的栽培品种当中。Southern杂交也再一次更加有力的说明外源基因CBF1通过有性杂交进入到了栽培品种的基因组中。3获得的转育成功的材料有TY-83-丰香,TY-80-土特拉,TY-104-达斯莱克特,TY-94-达斯莱克特,共计有16个株系。4电导法测定叶片的抗寒性,在各个温度处理下,转育成功的植株的电导率均低于未经过转育的植株。在-20℃时转育成功的植株的电导率有一个跃升,表明质膜在此温度范围内受损严重,而未经过转育的植株在-16℃时的电导率就明显增加,表明转CBF1基因植株抗寒性有所提高。5生长恢复实验测定植株的抗寒性,结果发现,对照有57.7%出现萎蔫受冻现象,而转育植株有35.6%出现萎蔫受冻现象。低温处理结束后于22℃~25℃进行恢复生长,对照有51.9%生长正常,而转育植株有73.2%生长正常,说明转育植株的抗寒性较对照植株有所提高,CBF1基因在转育的草莓中得到了表达。6细胞胞间结冰温度测定植株的抗寒性,转育植株的细胞胞间结冰温度在-6.11℃,而未转育的对照植株的细胞胞间结冰温度在-4.15℃,转育植株的细胞胞间结冰温度比未经转育的对照植株低1.96℃,试验结果说明转育植株的抗寒性提高了,CBF1基因在转育的草莓中得到了表达。
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