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由于生物传感器具有选择性好，灵敏度高，分析速度快，操作简易，价格低廉，甚至可以进行在线及活体分析，因此成为当前的研究热点之一。而生物传感器的性能主要取决于生物活性物质的固定方法，因此如何将生物活性组分有效地固定在电极表面上并保持其良好的生物活性是生物传感器研究和开发中最为重要的工作。本文正是基于以上考虑，探索和研究一系列生物分子固定方法。第一部分研究了新型酶放大电流响应信号的免疫传感器。1．采用自组装技术和静电吸附作用把纳米金沉积到二氧化钛膜修饰的金电极表面，然后吸附辣根过氧化物酶，随后组装纳米金用来固载癌胚抗体，最后利用分子量相近的辣根过氧化物酶代替常用的牛血清白蛋白封闭非特异性结合位点，制得性能优良的新型免疫传感器。利用循环伏安技术和交流阻抗技术表征整个自组装过程，用循环伏安技术测得峰电流与癌胚抗原在0.3～10和10～80 ng／mL范围内呈良好的线性关系，检出限为0.2 ng／mL。实验还探讨了纳米金的沉积时间、H2O2浓度、缓冲溶液的pH、孵育时间等对此免疫传感器的影响。实验表明：由本法制备的新型免疫传感器无需酶标抗原或抗体以及辣根过氧化物酶在封闭非特异性结合位点的同时不仅扩大该修饰电极的电流响应信号，同时能提高检测的灵敏度。2．利用自组装静电吸附技术研制了基于纳米金和硫堇层层自组装的电流型酶免疫传感器。本文以带正电荷的硫堇与带负电荷的纳米金颗粒通过静电吸附作用和共价键合作用层层自组装到二氧化钛膜修饰的电极表面。利用电子媒介体硫堇作为氧化还原探针间接检测癌胚抗原（CEA）的新方法。与传统的免疫物质测试方法相比，该方法具有无需对生物分子进行标记，测试液中也不需加入电子媒介体。经实验研究证明，该方法除操作简单，响应快，特异性强，还具有扩大抗体的固载量，并且大大提高了免疫传感器的灵敏度。第二部分研究了新型HRP酶生物传感器。1．用电化学聚合法在铂丝电极上制备聚硫堇，将其作为电子媒介体并且用于化学吸附纳米金，然后通过纳米金来固定辣根过氧化物酶，最后用聚乙烯缩丁醛包埋修饰好的电极，从而制备了新型过氧化氢生物传感器。该传感器还原峰峰电流与H2O2的浓度在2.15×10-6～1.43×10-2mol／L范围内呈良好的线性关系，检出限为2.00×10-7mol／L，相关系数为0.998。实验结果表明，此方法具有较好的灵敏度和抗干扰能力，同时具有良好的稳定性和重现性。2．通过自组装和静电吸附作用将辣根过氧化物酶和纳米金固定在二氧化钛膜修饰的电极表面，用循环伏安法和计时电流法研究了辣根过氧化物酶和金电极之间的直接电化学行为。对该传感器的性能以及影响该传感器性能的因素作了详细的研究。在最优的实验条件下，H2O2 0.7×10-6～6.89×10-3mol／L浓度范围内与其还原峰峰电流呈线性关系，检出限为0.3×10-6mol／L。并且该传感器在较高的H2O2浓度下表现出良好的米氏行为，其表观米氏常数KMapp为1.56 mmol／L。此外该传感器还具有较高的灵敏度，良好的重现性及较好的稳定性。