沙芥茎尖组织培养

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本实验选取沙芥无菌实生苗茎尖作为外植体,通过茎尖培养、腋芽增殖方式建立沙芥组织培养体系。研究无菌茎尖培养过程中外植体种类,光照强度对其生长的影响;初代培养过程中培养基,植物生长调节剂对腋芽诱导的影响:继代培养过程中培养基,植物生长调节剂种类、浓度及配比,AgNO3,蔗糖浓度,琼脂浓度对腋芽增殖的影响,同时选取田间腋芽作为外植体,探索其增殖生长情况;生根培养过程中培养基,生长素种类及浓度,NAA浸蘸浓度及时间对无菌苗生根的影响。研究结果如下:1、无菌茎尖培养:(1)完整茎尖存活率较高,较适宜获得茎尖苗;(2)最适宜茎尖生长的光照强度是36001x。2、初代培养:(1)B5培养基较适宜腋芽诱导,沙芥腋芽平均诱导个数为3.37个;(2)适宜诱导腋芽的植物生长调节剂组合是6-BA 5.0mg·L-1,IBA 0.5mg·L-1、1.0mg·L-1,腋芽平均诱导个数为4.17个、4.37个。3、继代培养:(1)MS培养基中腋芽的平均增殖倍数最高达到5.27个,最适宜腋芽增殖养;(2)细胞分裂素种类为6-BA、浓度为3.0mg·L-1,是最适宜沙芥腋芽增殖的细胞分裂素种类及浓度;(3)生长素种类为IBA、浓度为0.1mg·L-1,是最适宜腋芽增殖的生长素种类及浓度;(4) MS+3.0mg·L-16-BA+0.1mg·L-1 IBA的培养基,沙芥腋芽的平均增殖倍数高达7.43;(5)AgNO3显著降低腋芽增殖倍数;(6)最适宜沙芥腋芽增殖培养的蔗糖浓度为3.0%;(7)适宜沙芥腋芽增殖的琼脂浓度为0.4%、0.6%;(8)田间外植体经0.1%升汞消毒后不适宜进行继代培养和快速增殖。4、生根培养:(1)适宜无菌苗生根的基本培养基是1/2MS,平均生根率为4.00%;(2)适宜无菌苗生根的生长素种类为NAA,浓度为1.0mg·Lq,生根率为26.32%;(3)适宜无菌苗生根的NAA浸蘸浓度为100mg.Lq,浸蘸时间是60min,平均生根率为72.00%。
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