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我们先前的研究表明,蜡样芽孢杆菌对彭泽鲫的健康产生积极的影响,但其具体的调控机制尚不清楚。因此,本研究旨在探讨蜡样芽孢杆菌对彭泽鲫的作用机制。本研究中,彭泽鲫分别投喂添加109cfu/kg的活和灭活的蜡样芽孢杆菌(分别为CD和DCD组),以投喂基础饲料的彭泽鲫为对照组,试验周期为70天。
结果表明,摄食活和灭活的蜡样芽孢杆菌均能显著改善彭泽鲫的生长性能。活和灭活的蜡样芽孢杆菌可通过提高胰蛋白酶(Trypsin)和降低脂肪酶(LPS)影响肠道的消化能力,同时通过改善了肠道的形态结构增加肠道的吸收面积进而促进了营养的吸收。另外,活和灭活的蜡样芽孢杆菌可改善彭泽鲫肝功能如血清谷丙转氨酶(ALT)含量,同时降低了血清尿素氮(BUM)、血氨(AMM)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)的含量。
有趣的是,活蜡样芽孢杆菌明显改善肝脏的胆汁酸(TBA)合成能力,进而提高了血清的胆汁酸含量。同时,活蜡样芽孢杆菌显著提高了肝脏脂蛋白脂酶(LPL)、肝脂酶(HL)和乙酰辅酶A羧化酶(ACC)活性,改善了彭泽鲫肝脏脂肪代谢。而灭活的蜡样芽孢杆菌则能够显著降低肝脏中总胆固醇(TCHO)含量。另外,摄食活和灭活的蜡样芽孢杆菌通过影响肝脏的糖酵解和糖异生过程来进一步改善彭泽鲫的糖代谢过程。活的和灭活的蜡样芽孢杆菌提高了彭泽鲫的免疫水平,同时结果显示活和灭活蜡样芽胞杆菌显著上调了肠道组织基因LZMmRNA水平,且活菌诱导了IgM基因大量表达。
活的蜡样芽孢杆菌能显著提升血清抗氧化水平,因为它可以提高总超氧化物歧化酶(T-SOD)、微量谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、过氧化氢酶(CAT)的活性,还原型谷胱甘肽(GSH)的浓度。而在喂食灭活的蜡样芽孢杆菌的鱼类中,只检测到CAT活性明显较高,丙二醛(MDA)浓度在这两个添加剂组中显著降低。同时,通过提高CAT、GPX活性和GSH含量,以及显著降低MDA含量,提高了两个添加剂组的肠道抗氧化性能。基因表达分析结果(上调CAT、GPX等靶基因的mRNA水平)表明,肠道抗氧化性的改善似乎与Nrf2信号通路有关。此外,活的和灭活的蜡样芽孢杆菌可以通过抑制促炎细胞因子的表达来抑制肠道炎症反应,这是因Nrf2被激活后调节抗氧化系统,并诱导抗炎细胞因子IL-10的表达上调。然后,通过上调Claudin12、ZO1和/或Ocludin-like紧密连接蛋白的mRNA水平,改善了两个蜡样芽孢杆菌组的肠屏障功能。这些结果表明,添加益生菌-蜡样芽孢杆菌可以通过增强抗氧化能力抑制炎症反应,通过调控Nrf2信号通路改善彭泽鲫的肠道屏障功能,促进生长,进一步改善肠道健康。
结果表明,摄食活和灭活的蜡样芽孢杆菌均能显著改善彭泽鲫的生长性能。活和灭活的蜡样芽孢杆菌可通过提高胰蛋白酶(Trypsin)和降低脂肪酶(LPS)影响肠道的消化能力,同时通过改善了肠道的形态结构增加肠道的吸收面积进而促进了营养的吸收。另外,活和灭活的蜡样芽孢杆菌可改善彭泽鲫肝功能如血清谷丙转氨酶(ALT)含量,同时降低了血清尿素氮(BUM)、血氨(AMM)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)的含量。
有趣的是,活蜡样芽孢杆菌明显改善肝脏的胆汁酸(TBA)合成能力,进而提高了血清的胆汁酸含量。同时,活蜡样芽孢杆菌显著提高了肝脏脂蛋白脂酶(LPL)、肝脂酶(HL)和乙酰辅酶A羧化酶(ACC)活性,改善了彭泽鲫肝脏脂肪代谢。而灭活的蜡样芽孢杆菌则能够显著降低肝脏中总胆固醇(TCHO)含量。另外,摄食活和灭活的蜡样芽孢杆菌通过影响肝脏的糖酵解和糖异生过程来进一步改善彭泽鲫的糖代谢过程。活的和灭活的蜡样芽孢杆菌提高了彭泽鲫的免疫水平,同时结果显示活和灭活蜡样芽胞杆菌显著上调了肠道组织基因LZMmRNA水平,且活菌诱导了IgM基因大量表达。
活的蜡样芽孢杆菌能显著提升血清抗氧化水平,因为它可以提高总超氧化物歧化酶(T-SOD)、微量谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、过氧化氢酶(CAT)的活性,还原型谷胱甘肽(GSH)的浓度。而在喂食灭活的蜡样芽孢杆菌的鱼类中,只检测到CAT活性明显较高,丙二醛(MDA)浓度在这两个添加剂组中显著降低。同时,通过提高CAT、GPX活性和GSH含量,以及显著降低MDA含量,提高了两个添加剂组的肠道抗氧化性能。基因表达分析结果(上调CAT、GPX等靶基因的mRNA水平)表明,肠道抗氧化性的改善似乎与Nrf2信号通路有关。此外,活的和灭活的蜡样芽孢杆菌可以通过抑制促炎细胞因子的表达来抑制肠道炎症反应,这是因Nrf2被激活后调节抗氧化系统,并诱导抗炎细胞因子IL-10的表达上调。然后,通过上调Claudin12、ZO1和/或Ocludin-like紧密连接蛋白的mRNA水平,改善了两个蜡样芽孢杆菌组的肠屏障功能。这些结果表明,添加益生菌-蜡样芽孢杆菌可以通过增强抗氧化能力抑制炎症反应,通过调控Nrf2信号通路改善彭泽鲫的肠道屏障功能,促进生长,进一步改善肠道健康。