【摘 要】
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目的研究艰难梭菌毒素A (TcdA)对人慢性髓细胞白血病细胞株K562细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法采用MTT法检测TcdA的细胞毒作用,Hoechst33342染色和流式细胞仪观察细胞
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目的研究艰难梭菌毒素A (TcdA)对人慢性髓细胞白血病细胞株K562细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法采用MTT法检测TcdA的细胞毒作用,Hoechst33342染色和流式细胞仪观察细胞凋亡,免疫细胞化学法检测Bcl-2、Bax蛋白表达水平,比色法检测Caspase-3活性以及实时荧光定量(Real time) PCR检测Survivin mRNA的表达水平。结果TcdA能明显抑制K562细胞增殖,具有浓度和时间依赖性；荧光染色和流式细胞仪检测到细胞凋亡；TcdA作用后Bcl-2蛋白表达下降,而Bax蛋白表达明显增加,与对照组相比,差异有统计学意义(p<0.05); Caspase-3活性增强,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05); Survivin mRNA表达水平呈浓度依赖性下调,较对照组差异有统计学意义(p<0.01)。结论TcdA能明显抑制K562细胞增殖,并诱导其凋亡,其机制可能与上调Bax蛋白表达,激活Caspase-3及下调Survivin mRNA的表达水平有关。
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