马铃薯是粮菜兼用作物，因此占有重要地位，但易受多种病害危害退化而使产量降低、品质下降。解决马铃薯退化的根本途径是培育抗病品种，但传统的育种方法周期长、效率低，很难得到具有抗性的优良品种。利用现代生物技术手段，将抗病目的基因导入马铃薯培育抗病品种，是目前最为快速而有效的方法。 葡萄糖氧化酶(Glucose oxidase，GO)是一种需氧脱氢酶，它能专一地氧化β-D-葡萄糖成为葡萄糖酸和过氧化氢。过氧化氢在植物抗病反应中担当第二信使，其大量存在能直接杀菌和抑菌，在抗病机制中有着重要的作用。 商陆属植物的抗病毒蛋白(pokeweed antiviral proteins，PAP)是从商陆属(Phytolacca)植物植株中提取出来的一类碱性蛋白，对植物病毒、动物病毒、真菌和细菌有一定的抑制作用。在植物抗病毒方面，具有广谱性和高效性。利用其抗病毒活性的方法主要有二种，一是对植物体直接喷洒商陆属植物抗病毒蛋白的汁液；另一种方法是把商陆属植物抗病毒蛋白基因转入植物体，通过在植物体中表达商陆属植物抗病毒蛋白致使植物体表现出抗病性。 本试验旨在利用分子生物学方法，将pQE-GO质粒经HindⅢ、BamH Ⅰ酶切得到的目的基因GO,与同样经HindⅢ、BamH Ⅰ酶切pCAMBIA1380质粒得到的大片段在T4DNA连接酶作用下，构建含有GO基因的载体，经PCR和酶切检测证实中间载体构建成功。 通过农杆菌介导的方法目的基因转化广东马铃薯主栽品种费乌瑞它(Favorita)、大西洋(Atlantic)和底西瑞(Desiree)，优化了植株转化体系，探讨了影响转化频率的主要因素，获得了阳性转基因植株，为继续利用现代生物技术培育抗病毒病或抗晚疫病品种打下良好基础。本试验主要结果如下： 1.构建了载体pCAMBIA-GO。 2.获得转化的适宜条件：外植体预培养2d，侵染25min，共培养2d，转接至抑菌筛选MSG Ⅰ培养基+Km 50mg/L+Carb 500mg/L或+Hyg 30mg/L+Carb 500mg/L上进行培养，再转入MSG Ⅱ培养基+Km 50mg/L+Carb 500mg/L或+Hyg 20mg/L+Carb500mg/L上进行培养获得的抗性芽经伸长和生根培养得到转化体植株。 3.通过农杆菌介导，将目的基因转入供试材料中，并对对再生植株进行PCR检测，利用PCR-Southern杂交进一步检测，初步证明目的基因已经整合到马铃薯品种的基因组中。