利用转基因番茄表达人类酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)

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迄今为止,在人类中已经发现了22个成纤维细胞生长因子(FGF)超家族成员。成纤维细胞生长因子不但能够促进包括成纤维细胞、内皮细胞、软骨细胞、平滑肌细胞、黑色素细胞等多种细胞的增殖,而且还能够促进脂肪细胞的分化,引发巨噬细胞和成纤维细胞产生白细胞介素6(IL-6),刺激星形细胞的迁移,延长神经元的寿命。FGF在个体的发育、血管发生、造血、肿瘤发生中发挥重要作用,FGF是通在细胞外与4种FGF酪氨酸受体蛋白激酶相互作用来实现其生物学功能的。人类酸性成纤维细胞生长因子(aFGF,FGF-1)是成纤维细胞生长因子超家族成员。来自于三个胚层的多种细胞都可以表达aFGF。aFGF在治疗帕金森综合症、急性脊柱扭曲性损伤、断指中神经功能重建、脑缺血、肾缺血、心肌梗塞、闭塞性脉管炎、视网膜缺血、胃溃疡及难愈合性伤口等多种临床应用方面具有巨大潜力。 为了满足对aFGF这种价格昂贵的细胞因子的需求,本实验探索利用转基因植物表达aFGF。利用转基因植物大规模生产治疗性蛋白是一种非常有潜力的方法,这是因为此种方法安全、生产成本低、易于操作。我们构建的双元表达载体带有一个经过改构的人类酸性成纤维细胞生长因子基因(afgf),载体上的选择标记基因为manA,它使得转化过程中可以使用PMI这种不含抗生素及除草剂的选择系统。我们利用农杆菌介导的转化方法获得了afgf转基因番茄植物,并且通过PCR-Southern、RT-PCR证明了afqf在宿主基因组中的整合及表达。
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