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目的:研究不同方式白细胞介素-1β(IL-1β)预刺激骨髓间充质干细胞(BMMSCs)后，对核因子-kB(NF-kB)通路以及对成骨分化能力等的影响。 方法:1、Western blot方法检测IL-1β预刺激BMMSCs后ikbα和P-ikbα表达。实验分为三组:1）对照组A:BMMSCs阴性、2）实验组B: IL-1β预刺激BMMSCs一天组3）实验组C:IL-1β预刺激BMMSCs七天组。A、B、C组细胞收集提取总蛋白，使用western blot方法检测三组BMMSCs中ikbα和P-ikbα蛋白的表达水平，并进行统计学分析比较。 2、细胞免疫组织化学染色:对照组A、实验组B、实验组C的BMMSCs在预刺激结束后，采用细胞免疫组织化学染色方法检测各组BMMSCs的BMP-2、p-Smad1/5/8蛋白表达情况。 3、RT-PCR方法测定IL-1β预刺激BMMSCs后IGF-1、EphB4、OPG基因表达。A、B、C组细胞预刺激结束后，收集各组细胞部分提取总RNA，Real-Time PCR法测定三组BMMSCs中IGF-1、EphB4、OPG表达水平的变化，并进行统计学分析比较。 4、诱导BMMSCs成骨分化:实验分为四组:1）对照组A:BMMSCs阴性未诱导成骨组2）对照组B:BMMSCs阴性诱导成骨组3）实验组C: IL-1β预刺激BMMSCs一天组4）实验组D:IL-1β预刺激BMMSCs七天组。预刺激结束后B、C、D组加入成骨细胞诱导液，诱导14天后取碱性磷酸酶(ALP)进行染色，诱导21天后取茜素红(Alizarin Red)进行染色，以检测BMMSCs成骨分化的能力。实验还同时加用NF-kB的抑制剂(Pyrrolidine dithiocarbamate，PDTC)，研究IL-1β对BMMSCs成骨分化作用的影响。 结果:1、倒置显微镜下观察，对照组A、实验组B、C三组的BMMSCs形态都以长梭形为主，呈贴壁方式生长，三组BMMSCs形态上未见明显差异。 2、Western blot结果表明:与A组相比，B组、C组的ikbα蛋白水平的表达降低(P＜0.05)，P-ikbα蛋白水平的表达增高(P＜0.05)。 3、细胞免疫组织化学染色结果显示:与A组相比，B组、C组的BMP-2水平的表达增高，p-Smad1/5/8的表达无明显变化。 4、Real-time-PCR结果显示:与A组相比，B组和C组的IGF-1、EphB4、OPGmRNA表达水平上调(P＜0.05)。 5、检测BMMSCs成骨能力:采用Alizarin Red染色及ALP染色方法后结果显示:B、C、D三组BMMSCs均有向成骨分化的能力;但与B组相比，C组和D组的成骨分化能力较强，钙基质沉积较多，而加用NF-kB抑制剂后，C组和D组的成骨分化能力减弱，钙基质沉积较少。 结论:1、实验组与对照组细胞生长形态基本上一致。 2、和对照组相比，BMMSCs经IL-1β预处理后，其成骨分化活性增强，且多次IL-1β预处理较单次IL-1β预处理对BMMSCs的成骨分化能力影响更为明显; 3、IL-1β预处理BMMSCs其促进成骨分化的影响可通过NF-kB通路介导。 4、和对照组相比，实验组BMMSCs经IL-1β预处理后，增加BMP-2的表达。