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耐盐真菌是一类能够在高浓度的盐介质中仍能正常生长的微生物,具有独特的基因类型,高盐的特殊生存环境往往能够激活耐盐真菌某些特定的沉默基因,诱导一连串的微生物代谢途径,最终产生结构新颖的活性化合物。耐盐真菌作为药物发现的重要来源,近年来受到研究人员的广泛关注。细菌群体感应系统介导多种生物效应,可调控致病菌相关毒力因子的表达(促进病原菌胞外酶与毒素的产生、细菌运动、生物被膜的形成等),作为开发抗感染药物的新靶点,受到了高度重视。从中华补血草、野生大豆、蔓荆及罗布麻的根、茎、叶、果实等组织及根际土中分离纯化得到152株耐盐真菌,分别编号为L1-L152。通过对耐盐真菌的海水条件下大米培养基发酵产物的薄层色谱分析(TLC)、高效液相色谱分析(HPLC)和群体感应(QS)抑制活性评价,发现其发酵产物的化学种类多样。本文采用不同的发酵方法对筛选得到的3株耐盐真菌(L129,L36,L130)进行大规模发酵,用乙酸乙酯提取菌株的次生代谢产物后,综合使用正相硅胶色谱、葡聚糖凝胶色谱(Sephadex LH-20)、中压制备色谱等柱色谱技术进行分离,高压半制备色谱和半制备高效液相色谱技术进行纯化。得到的化合物的结构通过红外光谱(IR)、紫外光谱(UV)、核磁共振(NMR)、圆二色谱(CD)和质谱(MS)等手段进行鉴定。本文共分离得到33个化合物,其中29个已鉴定其结构:peniquinone A和B(1和2),penizofuran A(3),quinadoline D和A(4和5),3,4-dimethoxy-5-methylphenol(6),orcinol(7),1,3,5,6-tetrahydroxy-8-methylxanthone(8),mucorisocoumarins A(9),penicillic acid(10),dihydropenicillic acid(11),dechlorogriseofulvin(12),griseofulvin(13),isogriseofulvin(14),dehydrogriseofulvin(15),trans-capsaicin(16),dihydrocapsaicin(17),linoleic acid(18),dibutylphthalate(19),2,4-dihydroxy-5,6-dimethylbenzaldehyde(20),4,5-dimethylbenzene-1,3-diol(21),4,5,6-trimethylbenzene-1,3-diol(22),2,4-dihydroxy-5,6-dimethylbenzoic acid(23),asterric acid(24),methyl dichloroasterrate(25),dihydrogeodin(26),iizukine B(27),questin(28),nafuredin A(29),化合物1-4为新化合物。最后采用打孔法对部分化合物进行群体感应抑制(紫色杆菌CV026,Chromobacterium violaceum 026)活性测试,采用药敏片扩散法对部分化合物进行抗细菌(金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis、大肠杆菌Escherichia coli和铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa)活性测试及抗真菌(香蕉炭疽菌Colletotrichum musae ACCC31244、毛核炭疽菌Colletotrichum coccodes ACCC 36067、芒果采后炭疽病菌Colletotrichum asianum T0408、水稻稻瘟病菌Magnaporthe grisea ACCC 37631)活性测试,采用MTT法对部分化合物进行细胞毒(人乳腺癌细胞MCF-7,人肺癌细胞A549,人神经胶质瘤细胞U87,人前列腺癌细胞PC3)活性测试。活性测试结果显示,化合物1和2对MCF-7,U87和PC3细胞株均表现出较好的细胞毒性,IC50分别为12.39,9.01,14.59μM和25.32,13.45,19.93μM;化合物13和14对香蕉炭疽菌具有显著的抗真菌活性,MIC值均为0.1μg/片,化合物14也显示对毛核炭疽菌的抗真菌活性,MIC值为0.1μg/片;化合物2和8对紫色杆菌CV026的QS抑制活性均较弱,MIC值均为20μg/孔,化合物10为青霉酸,是经典的强群体感应抑制剂。