美国白蛾幼虫肠道消化酶活性和细菌多样性研究

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美国白蛾Hyphantrieacuna是一种重要的入侵害虫,寄主范围非常广泛,对我国农林生产造成重大损失。为了探索美国白蛾消化酶系统及肠道微生物在适应不同寄主植物中所起的作用,本研究对取食8种寄主植物的美国白蛾5龄幼虫的主要消化酶活性进行了比较分析;利用Illumina Miseq二代测序技术分析了美国白蛾5龄幼虫肠道细菌群落的多样性及取食3种不同食料的幼虫肠道细菌群落的差异性。研究结果如下:1、分别测定了取食8种不同寄主植物(臭椿Ailanthus altissima、柳树Salix babylonica、美桐 Platanus occidentalis、榆树 Ulmus pumila、加杨 Populus X Canadensis、连翘Forsythia suspensa、白蜡Fraxinus chinensis和桑树Morus alba)的美国白蛾5龄幼虫肠道的淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶活性。结果表明,淀粉酶活性从高到低的顺序依次是寄主为臭椿、柳树、美桐、榆树、加杨、连翘、白蜡、桑树的样本;脂肪酶活性由大到小的顺序依次是寄主为臭椿、柳树、加杨、连翘、榆树、美桐、白蜡、桑树的样本;胰蛋白酶活性从大到小顺序是寄主为柳树、加杨、榆树、臭椿、桑树、连翘、美桐、白蜡的样本。取食不同寄主植物的幼虫三种消化酶活性均存在显著差异(P<0.05)。2、利用Illumina Miseq二代测序技术分别对取食人工饲料、桑树和柳树的美国白蛾5龄幼虫肠道细菌的16S rDNA基因序列V3-V4高变区进行测序分析,共聚类了5247个OTUs,这些OTUs共注释到的细菌有23个门,60个纲,90个目,143个科,196个属和58个种。在门水平上,取食3种食料的美国白蛾幼虫的肠道优势细菌都为变形菌门Proteobacteria和厚壁菌门Firmicutes。纲水平上,取食人工饲料的美国白蛾肠道菌群的优势菌为γ-变形菌纲γ-Proteobacteria;取食桑树、柳树的美国白蛾肠道菌群优势菌为α-变形菌纲α-Proteobacteria。目水平上,取食人工饲料的美国白蛾肠道菌群优势菌为海洋螺菌目Oceanospirillales;而取食桑树、柳树为的美国白蛾幼虫肠道菌群中立克次氏体目Rickettsiales。科水平上,取食人工饲料的美国白蛾肠道优势菌为盐单胞菌科Halomonadaceae;而在取食桑树、柳树的美国白蛾肠道优势菌为Mitochondria。属水平上,取食3种食料的美国白蛾肠道菌群优势属各不相同,取食人工饲料、桑树和柳树的美国白蛾肠道菌群优势属分别为希瓦氏菌属Shewanella、葡萄球菌属Staphylococcus和芽孢杆菌属Bacillus。种水平上,取食人工饲料和柳树的美国白蛾肠道优势菌海藻希瓦氏菌Shewanella algae;取食桑树的美国白蛾肠道优势菌为松鼠葡萄球菌Staphylococcus sciuri。3、取食3种食料的美国白蛾幼虫肠道细菌的Alpha多样性指数和OTUs Rank曲线表明取食3种食料的美国白蛾幼虫肠道的细菌群落均有较高的丰富度和多样性。取食3种食料的美国白蛾幼虫肠道细菌OTUs的维恩图分析、细菌物种丰度聚类热图、主成分分析及Beta多样性指数热图等方面表明不同食料的美国白蛾幼虫肠道的细菌群落结构存在一定差异。
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