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目的:本实验针对临床怀疑结核性肛瘘的患者行手术切除的瘘管,分别使用病理及荧光PCR检查及抗酸染色检查,探讨结核杆菌DNA PCR检查在结核性肛瘘诊疗中的应用,即针对临床怀疑结核性肛瘘的患者,荧光PCR不但可以对病理确诊的患者起辅助诊断,而且对病理怀疑及病理上不能诊断的患者可以辅助诊断,提高结核性肛瘘检出率,防止漏诊。方法:本实验以临床怀疑结核性肛瘘的患者行手术切除的60例瘘管,临床怀疑结核患者分为三组,病理明确诊断20例,病理怀疑结核20例,病理为炎性瘘管组织,不考虑结核性肛瘘诊断的20例。标本来源于2009.1~2013.6年遵义医学院病理科临床怀疑结核性肛瘘瘘管组织,全部瘘管为石蜡包埋。病理明确诊断组其中男10例,女10例,病理表现可见结核性肉芽肿及结核结节,平均年龄(45.23±5.61)岁。病理怀疑结核组其中男8例,女12例,平均年龄(40.03±4.23)岁,病理表现可见少量坏死,未见明确的结核性肉芽肿及结核结节。病理未发现异常组其中男12例,女8例,平均年龄(47.21±3.21)岁,病理表现可见炎性反应。针对其石蜡包埋的瘘管组织提取DNA,采用荧光PCR的方法分别检测结核分枝杆菌保守的重复序列IS6110的片段。结果:1.病理明确诊断20例,荧光PCR检测阳性19例,阴性1例,抗酸染色检测阳性12例,阴性8例。病理与荧光PCR比较,荧光PCR出现1例假阴性,两种方法明显差异(P<0.05),病理与抗酸染色比较,符合12例,两种方法无明显差异(P>0.05)。荧光PCR与抗酸染色比较,荧光检测率明显高于抗酸染色,说明荧光PCR灵敏度高于抗酸染色,两种方法明显差异(P<0.05)。2.病理怀疑结核20例,病理怀疑组通过抗结核治疗伤口愈合,无复发。荧光PCR检测阳性19例,阴性1例,抗酸染色检测阳性0例,阴性20例。病理与荧光PCR比较,荧光PCR确诊19例,假阴性1例,荧光PCR可以有力辅助诊断病理可疑的诊断,两种方法明显差异(P<0.05)。病理与抗酸染色比较,符合0例,两种方法无明显差异(P>0.05),荧光PCR与抗酸染色比较,荧光检测率明显高于抗酸染色,说明荧光PCR灵敏度高于抗酸染色,两种方法明显差异(P<0.05)。3.病理未发现异常的20例,荧光PCR检测阳性8例,阴性12例,抗酸染色检测阳性0例,阴性20例。病理与荧光PCR比较,检测出8例阳性,电话随访可知患者行抗结核治疗后伤口愈合,可见荧光PCR可以有效防止漏诊,提高结核性肛瘘的检测率,但两种方法明显差异(P<0.05)。病理与抗酸染色比较,抗酸染色阳性0例,两种方法无明显差异(P>0.05),荧光PCR与抗酸染色比较,荧光检测率明显高于抗酸染色,说明荧光PCR灵敏度高于抗酸染色,但两种方法明显差异(P<0.05)。结论:1.荧光PCR可以对已病理确诊结核性肛瘘的患者,辅助其结核性肛瘘的诊断。荧光PCR尤其可以对病理怀疑及病理不考虑结核性肛瘘的患者,行辅助结核性肛瘘的诊断,提高结核性肛瘘检测率,防止漏诊。2..荧光PCR的敏感性优于抗酸染色,可以作为结核病与非结核病的鉴别诊断,尤其对于那些常规HE染色和抗酸染色无法确诊的病例更有意义。