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研究目的:利用C57BL/6遗传背景下的Langerin基因敲除小鼠(Langerin-KO)及野生型(Wild-type,WT)小鼠建立卡泊三醇(Calcipotriol,MC903)和卵清蛋白(ovalbumin,OVA)诱导的特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)小鼠模型,探索Langerin对AD的皮肤及系统性炎症的影响和机制。研究方法:1.AD小鼠模型的建立:首先将雌性C57BL/6 WT小鼠随机分成MC903与OVA(MC903+OVA)组、MC903组及对照组,建立AD模型。通过评估皮损表现、检测耳部肿胀程度、皮肤组织病理(HE染色)和血清总IgE、IgG1、IgG2a水平评估AD模型制备效果。2.研究Langerin对AD小鼠模型的免疫调节作用(1)探索Langerin是否参与MC903诱导的AD小鼠模型的皮肤炎症:取C57BL/6遗传背景下的Langerin-KO小鼠及WT小鼠,随机分成MC903组及对照组,共4组。造模方式同前。造模结束后,比较耳部肿胀程度、耳部皮损HE染色、血清总IgE水平、引流淋巴结淋巴细胞比例及皮损细胞因子表达。(2)探索Langerin是否参与OVA诱导的AD小鼠模型的经皮致敏:取C57BL/6遗传背景下的Langerin-KO小鼠及WT小鼠,随机分成MC903+OVA组及对照组,共4组。造模方式同前。造模结束后检测上述病理生理指标。研究结果:1.小鼠AD模型的建立:与对照组相比,模型组鼠耳可见肿胀、潮红、脱屑等炎症反应;与对照组相比,造模组鼠耳肿胀增厚明显,差异有统计学意义(P<0.05)。皮损组织病理显示:模型组鼠耳表皮角化过度,表皮增厚,真皮浅层可见以淋巴细胞为主的炎症细胞浸润,而对照组鼠耳未见明显炎症反应。模型组小鼠血清中总IgE、IgG1明显升高,IgG2a组间无明显差异。2.研究Langerin对AD小鼠模型的免疫调节作用(1)Langerin不参与MC903诱导的AD小鼠皮肤炎症:在MC903组,WT与Langerin-KO小鼠耳厚度、皮损组织病理、血清总IgE、及耳部皮损mRNA检测TSLP细胞因子表达均较对照组改变明显,差异有统计学意义(P<0.05),但造模组两组间未见明显差异。(2)Langerin参与OVA诱导的AD小鼠模型经皮致敏:进一步建立MC903+OVA经皮致敏模型发现,与WT小鼠相比,Langerin-KO小鼠耳肿胀增厚更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。皮损组织病理HE染色示:Langerin-KO小鼠的表皮角化、增厚更明显,真皮炎症细胞浸润更明显。淋巴结中单细胞悬液组分流式分析示:Langerin基因敲除小鼠的淋巴结中,CD11c+树突状细胞、CD19+B细胞数量明显增多,CD4+CD25+CD127-Treg细胞的数量明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。Langerin-KO小鼠的总IgE水平明显高于WT小鼠。Langerin-KO 小鼠的耳部组织检测 TSLP、IL-4、IL-13、IL-17A、IL-22 的 mRNA 表达均较WT小鼠高,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组两组间无明显差异。研究结论:在AD小鼠模型中,Langerin对OVA抗原的经皮致敏过程中发挥负向免疫调控作用。