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目的： 建立错配修复基因PMS2表达下调的卵巢癌A2780细胞株,体外研究该肿瘤细胞迁移、增殖及凋亡的变化。 方法： 选取卵巢癌A2780细胞株进行培养,用siRNA下调PMS2的表达。实时荧光定量PCR法检测转染48h后PMS2mRNA的相对表达水平。免疫印迹法检测转染72h后PMS2蛋白的相对表达水平。Transwell迁移实验和划痕实验研究PMS2表达下调后肿瘤细胞迁移能力的改变。台盼蓝拒染法检测PMS2表达下调后,肿瘤细胞增殖能力的变化。流式细胞术(FACS)分析PMS2表达下调对癌细胞凋亡的影响。 结果： 1.siRNA可下调A2780细胞的PMS2表达 (1)RT-PCR法检测出转染siRNA后PMS2mRNA的相对表达量明显下降。同空白组相比,转染PMS2-homo-124,PMS2-homo-2190,PMS2-homo-236的mRNA相对表达量降低,其相对表达水平分别为(4.17±0.51)％,(0.14±0.15)%,(10.67±4.30)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。我们选择转染效率较高的质粒PMS2-homo-124,PMS2-homo-2190进行后续实验。 (2)免疫印迹法证明转染后PMS2蛋白的相对表达量明显下降。转染72h后,PMS2-homo-124,PMS2-homo-2190的蛋白相对表达量分别为(0.73±0.47)、(2.19±0.42),明显低于空白组,差异有统计学意义(P<0.05)。 2.PMS2表达下调后细胞迁移增加。Transwell迁移实验可见:穿膜细胞PMS2-homo-124组(105.3±8.41)和PMS2-homo-2190组(126.62±34.59)比NC组(51.25±15.41)和空质粒转染组(48.30±6.77)数量多,差异有统计学意义(P<0.05)。划痕实验也可见:PMS2表达下调细胞迁移明显比NC组及空白组多。 3.PMS2表达下调后细胞增殖能力增强。台盼蓝拒染法证明:转染48h后PMS2表达下调细胞增殖活力比NC组及空白组高。 4.PMS2表达下调后细胞凋亡率无明显变化。转染PMS2-homo-124和PMS2-homo-2190后癌细胞总凋亡率分别为(6.47±2.73)%和(5.47±2.13)%与NC组(5.9±1.8)%及空白组(5.33±2.57)%相比较,差异无统计学意义(P>0.05),早期凋亡率也无明显差异(P>0.05)。 结论： 下调人卵巢癌A2780细胞株中的PMS2表达后,肿瘤细胞的迁移力和增殖活力均增强,但凋亡率无明显改变,提示PMS2可能通过促细胞增殖和迁移参与卵巢癌的发生发展。