【摘 要】
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镉(Cd)污染日益严峻,使镉暴露成为一个普遍问题。肝脏是Cd暴露的主要靶器官,到目前为止,仍然缺乏有效的手段来治疗镉暴露导致的肝损伤。因此,本研究构建了一株表达金属硫蛋白(MT)的工程菌,命名为大肠杆菌Nissle1917(Ec N)-MT。从EcN-MT益生性质角度评估其生长特性、质粒稳定性、耐酸性、耐胆盐性、抗氧化性,详细研究了EcN-MT对镉离子的结合能力。同时,从组织学、分子生物学、微生态
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镉(Cd)污染日益严峻,使镉暴露成为一个普遍问题。肝脏是Cd暴露的主要靶器官,到目前为止,仍然缺乏有效的手段来治疗镉暴露导致的肝损伤。因此,本研究构建了一株表达金属硫蛋白(MT)的工程菌,命名为大肠杆菌Nissle1917(Ec N)-MT。从EcN-MT益生性质角度评估其生长特性、质粒稳定性、耐酸性、耐胆盐性、抗氧化性,详细研究了EcN-MT对镉离子的结合能力。同时,从组织学、分子生物学、微生态方面评估EcN-MT对亚慢性镉暴露小鼠模型的治疗效果,并从镉暴露导致的纤维化、氧化应激、炎症、凋亡、肠道菌群紊乱角度进行详细研究。最后,在验证EcN-MT具有良好疗效的基础上,进一步探究其具体作用的分子机制,明确EcN-MT工程菌治疗作用中MT治疗效果和Ec N益生性的复合关系。主要研究结论如下:(1)EcN-MT具有优良的益生特性,结合镉的能力是Ec N益生菌的3.6倍,具备治疗Cd暴露的潜力。(2)EcN-MT治疗使镉暴露小鼠肝组织中的镉含量减少26.3%、粪便中镉的排出量增加24.7%,同时显著减轻肝脏的病变、纤维化、氧化应激,从而改善亚慢性镉暴露小鼠肝毒性。(3)EcN-MT通过表达MT抑制TLR4/NF-κB炎症信号通路的激活,进而抑制与之相关的调亡、炎症细胞因子、纤维化的表达和氧化应激反应,减少肝损伤。(4)EcN-MT通过宿主细菌Ec N的益生性显著增加小鼠肠道Akkermansia、Muribaculaceae、Lachnospiraceae、Dubosiella等益生菌的丰度,重塑肠道菌群稳态从而减少肝脏损伤。
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