核桃青皮提取物抑菌活性研究

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本试验于2006~2008年在北京农学院中心实验室进行。以苹果轮纹病菌、苹果腐烂病菌、桃褐腐病菌、苹果斑点落叶病菌、茄子枯萎病菌、小麦赤霉病菌6种病原真菌为靶标,对核桃青皮提取物进行抑菌活性测定。主要结果如下:1.采用5种溶剂对核桃青皮进行平行提取,对6种供试病原真菌进行抑菌活性测定,结果表明,核桃青皮水提取液对供试的6种病原真菌抑制效果最好,抑制率达到96%以上,石油醚提取液对供试的6种病原真菌抑制效果最差。2.选用石油醚、氯仿和乙酸乙酯对核桃青皮甲醇提取物的水溶液进行萃取,不同溶剂萃取物稀释成不同浓度后对6种供试病原真菌进行抑菌活性测定,结果表明,随着浓度的增大,各萃取物对不同病原菌的抑制效果随之增大,当浓度为4 mg·mL-1时,桃青皮甲醇提取物的氯仿萃取物对桃褐腐病菌的抑制效果最好,抑制率为71.54%,乙酸乙酯萃取物对小麦赤霉病菌的抑制效果最差,抑制率仅为18.32%。因此,选用核桃青皮甲醇提取物的氯仿萃取物作进一步的试验试材。3.为了进一步纯化得到核桃青皮中的活性成分,采用柱层析对核桃青皮氯仿萃取物进行分离。以硅胶为吸附剂,选用石油醚和氯仿不同配比溶液作为洗脱液,薄层层析分析得到8个流分,并对各流分做了室内抑菌生测试验,结果表明,流分Ⅴ、Ⅵ和流分Ⅶ对6种病菌均表现出较好的抑菌活性,其中Ⅵ对桃褐腐病菌的抑制效果最好,抑制率为24.5%,流分Ⅴ对桃褐腐病菌的抑制活性次之,抑制率为16.62%。4.通过显微镜观察,发现流分Ⅵ对桃褐腐病菌的菌丝形态结构有明显的破坏作用,表现为菌丝先断裂,细胞膨大呈泡囊状,之后菌丝呈串珠状膨大断裂成段,细胞质外漏。
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