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河川沙塘鳢(Odontobutis potamophlia)和鸭绿沙塘鳢(Odontobutis yaluensis)均是隶属于鲈形目(Perciformes)、虾虎鱼亚目(Gobioidei)、沙塘鳢科(Odontobutidae)、沙塘鳢属(Odontobutis)的鱼类。河川沙塘鳢和鸭绿沙塘鳢其肉质细嫩、味道鲜美、营养丰富,深受人们的喜爱,具有较为广阔的开发和利用前景,目前已经成为我国重要的人工增养殖经济鱼类。但目前沙塘鳢人工育苗技术还不稳定,急需攻克该鱼人工育苗的关键技术。本文通过对河川沙塘鳢人工繁育过程中几个关键因子的研究,为该鱼的人工规模化繁育提供重要的参考资料。同时通过克隆鸭绿沙塘鳢线粒体DNA全长并分析其结构特征,构建河川沙塘鳢和鸭绿沙塘鳢等22种塘鳢鱼类的系统进化树,为研究塘鳢鱼类系统发育关系及起源演化提供基础资料。主要研究结果如下：1.河川沙塘鳢早繁技术研究在11月份,选择一龄以上的河川沙塘鳢作为亲本,在室内升温培育,使亲本所处环境比同期室外水温高。经过21天在不同温度下的积温培育,解剖亲鱼观察发现,雌性亲鱼卵呈圆球形,半透明,淡黄色或金黄色,卵中有数百个大小不等的油球,雄性亲鱼精巢呈乳白色,饱满而亮泽,生殖乳突明显呈红色,即亲鱼性腺快速发育,性腺成熟,可以实现河川沙塘鳢提早繁殖。其中,在24℃的水温下培育的河川沙塘鳢产卵量最高,达到一尾雌鱼平均可产卵1547粒。2.温度对河川沙塘鳢胚胎发育的影响将河川沙塘鳢受精卵置于不同水温下(15、18、21、24、27和30℃)发育,用显微镜观察记录胚胎发育到不同时期所需的时间。结果表明,随着温度的降低,胚胎的发育进程会越来越迟缓。当水温降低到15℃以下时,部分受精卵会在孵化前的囊胚-原肠胚期停滞,无法正常发育至孵化。在15℃-30℃范围内,随着温度的升高,河川沙塘鳢受精卵发育到各个时期的时间越来越短,但是在达到30℃时,胚胎发育多出现畸形,并相继死于体节期。当温度在27℃时,虽然胚胎发育速度较快,但畸形率较高,达9.7%；当温度在18℃-24℃时只有极少量的胚胎发生畸形。通过比较不同水温的胚胎孵化率,发现在24℃时孵化率最高(83.7%)；18℃和21℃的孵化率也较高(70%以上)；15℃和27℃的孵化率较低(40%-60%)。30℃的孵化率最低(13%)。综合孵化时间、孵化率和畸形率等因素,21℃-24℃是河川沙塘鳢胚胎发育的最适温度范围。3.河川沙塘鳢受精卵水霉病的防治研究挑选正常发育的河川沙塘鳢受精卵,分别用2.0、4.0、8.0、16.0和32.0 mg/L的高锰酸钾溶液、亚甲基蓝溶液和氯化钠溶液处理,观察受精卵的发育情况。实验发现,亚甲基蓝在4.0-32.0 mg/L的浓度范围内,胚胎的水霉感染率低于10%,氯化钠在16.0-32.0 mg/L的浓度范围内,胚胎的水霉感染率低于10%,高锰酸钾在2.0-32.0 mg/L的浓度范围内,胚胎的水霉感染率一直高于40%。由此说明亚甲基蓝和高浓度的氯化钠都可以有效控制水霉,但是经过高浓度的氯化钠处理的河川沙塘鳢受精卵,最终出膜率低于20%。而亚甲基蓝在4.0-8.0 mg/L的浓度范围内,出膜率在80%以上。综合水霉感染率和孵化率,亚甲基蓝对河川沙塘鳢胚胎水霉病预治效果最好,高锰酸钾次之,氯化钠最差。4.盐度对河川沙塘鳢幼鱼存活和生长的影响设置6组不同盐度梯度(0.0、2.0、4.0、6.0、8.0和10.0‰)对河川沙塘鳢幼鱼存活和生长的影响研究,河川沙塘鳢在不同盐度下其特定生长率由高至低依次为4.0>2.0>6.0>8.0>10.0>0.0‰。盐度为4.0‰特定增长率最高,即河川沙塘鳢幼鱼在4.0%o生长最快。盐度为0.0‰时,幼鱼生长极其显著慢于其他盐度组。而且随着时间的推移,各盐度之间的特定增长率差异逐渐减小,即低盐水在前期刺激了幼鱼快速生长。在2.0-6.0‰盐度范围内,河川沙塘鳢在35d内的成活率变化在61.67%-85.00%之间,在盐度10‰成活率较低,仅为13.33%,在盐度0.0‰成活率为73.33%。表明在盐度0.0-6.0‰范围内,河川沙塘鳢幼鱼可以正常存活、生长。综合存活率和特定增长率,在盐度2.0-4.0-‰范围内河川沙塘鳢幼鱼的生长最快且有较高的存活率。5.鸭绿沙塘鳢线粒体DNA全长的克隆通过PCR技术克隆得到鸭绿沙塘鳢线粒体DNA序列,全长为16,909bp,由13个蛋白质基因、22个tRNA基因、2个rRNA基因,2段主要的非编码区：轻链复制起始区和控制区(D-loop),以及散布于各基因之间的非编码序列组成。鸭绿沙塘鳢线粒体DNA序列碱基含量为A(30.48%),C(28.990%),G(15.28%),T(25.25%),AT含量(55.73%)略高于GC(44.27%),与多数脊椎动物类似。6.基于线粒体全长基因序列研究塘鳢鱼类的系统进化关系从GenBank数据库(http://www.ncbi.nlm.nih. gov/中检索和下载得到已公布的21种塘鳢鱼类线粒体全基因组序列,与本文克隆得到的鸭绿沙塘鳢线粒体全基因组用MEGA5.0软件采用邻接法NJ和最大似然法ML构建系统发育树。其中中华沙塘鳢(Odontobutis sinensis)与斑尾复虾虎鱼(Synechogobius ommaturus)的遗传距离最大为0.333,云斑尖塘鳢(Oxyeleotris marmorata)与线纹尖塘鳢(Oxyeleotris lineolatus)的遗传距离最小为0.022。鸭绿沙塘鳢与河川沙塘鳢的遗传距离为0.092,河川沙塘鳢、鸭绿沙塘鳢、中华沙塘鳢与平头沙塘鳢(Odontobutis platycephala)之间的遗传距离为0.092-0.192,说明四种常见沙塘鳢鱼类中,河川沙塘鳢和鸭绿沙塘鳢的亲缘关系最近。