植物源抗病毒剂VFB抗烟草花叶病毒(TMV)活性研究

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VFB 是由西北农林科技大学无公害农药研究服务中心从马齿苋(Portulacaoleracea)、甘草(Glycyrrhiza)等几种植物材料中提取加工而成的一种植物源抗病毒剂。前期研究表明,VFB对烟草、辣椒等多种作物上的病毒病具有较好的保护和治疗作用。本研究以心叶烟(Nicotiana glutinosa)和普通烟(Nicotiana tabacum)为寄主材料,以烟草花叶病毒(Tobacco mosaic tobamovirus, TMV)为供试毒源,测定VFB的抗病毒活性和寄主植物生理生化及组织病理学的变化,主要得出以下结果: VFB对TMV 具有明显的体外钝化作用。采用半叶枯斑法,将VFB与TMV 接种液混合,钝化0.5h、1h 和2h 后接种在心叶烟上,其钝化率分别达到44.41%、55.62%、64.43%,与钝化时间成正比,且高于同一剂量下对照药剂病毒A 的钝化效果。VFB具有抑制TMV 初侵染的能力。试验结果表明VFB在TMV 侵染前施用能降低其侵染力,且对心叶烟体内TMV的复制增殖有一定的抑制作用。VFB在病毒侵染前48h施药的效果要好于在病毒侵染前24h施药的效果;接种24h后施药,其在心叶烟体内抑制TMV 复制增殖的效果达到36.15%。室内盆栽试验表明VFB对普通烟花叶病毒病( TMV)具有良好的预防和治疗效果,且以喷雾加灌根法施药效果最佳。施药14d 和21d 后,VFB的预防效果分别达到75.00%和51.11%,治疗效果达到68.75%和41.67%,均高于对照药剂病毒A 同期的预防和治疗效果。药剂处理3、6、9 和12d 后,测定普通烟叶片中叶绿素、总酚、类黄酮、游离氨基酸和丙二醛(MDA)含量,结果发现经VFB处理的普通烟叶片中叶绿素、总酚、类黄酮和游离氨基酸含量与发病对照相比明显提高;MDA 含量与发病对照相比,有所下降。药剂处理3、6、9 和12d 后,测定普通烟叶片中过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)及苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性,结果发现VFB能够诱导普通烟叶片中的POD、PPO 及PAL 等细胞防御酶活性增强。聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分析表明,VFB能够诱导产生新的POD 和PPO 同工酶带,其与寄主的抗病性相关。超微结构观察结果表明感染TMV 后普通烟叶片中大部分细胞结构受到不同程度的破坏,经VFB处理的烟草叶片中TMV粒体发生断裂,其外壳蛋白组装受到明显影响,叶绿体和线粒体的解体得到减轻,并产生大量嗜锇颗粒和膜体。由上述可知,VFB对烟草病毒病具有较好的保护和治疗作用;VFB对TMV具有明显的体外钝化作用,可使病毒粒子发生断裂,影响其外壳蛋白的组装,从而抑制TMV
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