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目的：研究黄芪(Astragalus, AST)对人胰腺癌细胞株PANC-1中的P-糖蛋白的抑制作用和逆转其耐药性的效果。方法：选用人胰腺癌耐药细胞株PANC-1,通过MTT法和免疫组织化学等方法,评价黄芪对P-糖蛋白(P-gp)介导的耐药机制的逆转作用。采用MTT法测定不同浓度的黄芪,5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)及黄芪和5-Fu联合用药的情况下对胰腺癌细胞增殖作用的抑制效果,用免疫组织化学的方法检测使用不同浓度的黄芪,5-氟尿嘧啶的情况下对P-糖蛋白表达的影响。结果：由MTT法检测AST和5-Fu对PANC-1细胞单独抑制情况结果可见,两种药物与各自对应的对照组相比,均能明显抑制胰腺癌PANC-1细胞的增殖,同一药物不同浓度组间均数的两两比较结果显示：AST随其浓度的增高,对PANC-1细胞的抑制变化无明显差异,而5-Fu随其浓度的增加出现抑制性增强,提示5-Fu对PANC-1细胞的增殖抑制作用在一定范围内具有浓度依赖性。由5-Fu单独作用于PANC-1细胞的增殖抑制作用结果可见,5-Fu对PANC-1细胞增殖抑制率达15-30%时的药物浓度为0.5ug/ml和5ug/ml,为减少药物浓度过大时可能产生的药物毒性作用,我们选择0.5ug/ml作为与不同浓度的AST联合用药时的最终浓度。由AST与5-Fu联合用药对胰腺癌PANC-1细胞的抑制作用结果可见,不同浓度AST联合5-Fu(0.5ug/ml)后,对胰腺癌PANC-1细胞的增殖抑制率明显升高,接近或大于两种药物单独用药抑制率之和,与单独5-Fu或相应浓度AST组比较,差异有显著性,表明联合用药可显著提高单独用药对胰腺癌PANC-1细胞的增殖抑制作用。联合效应分析结果显示,2.5mg/ml、5 mg/ml的AST与5-Fu的联合效应为相加效应,10mg/ml、20 mg/ml的AST与5-Fu的联合效应为协同效应。由各组实验Akt与Mdr-1蛋白表达免疫细胞化学染色结果可见,Mdr-1、Akt在PANC-1细胞中的阳性表达均呈棕色反应。与Akt对照组相比,分别加入AST和5-Fu作用24h后,胞质的棕色颗粒都出现明显减少,其中5-Fu组比AST组作用下棕色着色颗粒多,AST在20mg/ml的浓度下颜色变化比5mg/ml更为明显,表明药物作用下,Akt蛋白的表达量出现明显降低。IOD值的统计分析显示,不同实验组间与对照组相比Akt蛋白表达差异具有显著性,Akt对照组与5-Fu组之间Akt表达无明显差异；5mg/mlAST组与20mg/mlAST组之间Akt表达差异有显著性。Mdr-1蛋白在不同组间的表达情况与Akt蛋白变化相似,各实验组与对照组相比差异有统计学意义,Mdr-1对照组与5-Fu组之间Mdr-1表达无明显差异；5mg/mlAST组与20mg/mlAST组之间Mdr-1表达差异有显著性。结论：在胰腺癌细胞中,P-糖蛋白呈高表达,针对P-糖蛋白,黄芪能有效地抑制P-gp的表达及功能,从而拮抗P-gp介导的多药耐药,显著提高化疗药物5-Fu对胰腺癌PANC-1细胞的增值抑制作用,为逆转多药耐药展示了良好的前景。