目的：探讨影响人骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）体外成骨分化的某些相关因素。观察人MSCs构建组织工程骨体内异位成骨能力。检测兔骨髓MSCs构建组织工程骨修复骨缺损的效果。方法：体外培养、鉴定人骨髓MSCs。检测地塞米松（dexamethasone，Dex）、雌激素及冻存等对人MSCs成骨分化相关基因及蛋白表达的影响。利用MTT法及电镜观察人MSCs在壳聚糖一磷酸钙骨水泥支架上生长情况，并将工程化骨植入兔肌袋模型中，用组织学及免疫组化等方法检测其体内异位成骨能力。分离、培养、诱导兔骨髓MSCs并构建组织工程骨，原位植入兔桡骨骨缺损，通过影像学、组织学及生物力学等手段检测其骨修复效果。结果：人骨髓MSCs表达CD29及CD44抗原，在体外可分化为成骨、软骨和脂肪细胞。10-8mol／L Dex可促进人MSCs的ALP mRNA表达而抑制PPARγ2 mRNA转录，当Dex浓度为10^-7mol／L时则作用相反。雌激素可上调人MSCs的BMP-2mRNA表达。细胞冻存对人MSCs成骨诱导后ALP及Ⅰ型胶原表达没有影响。壳聚糖-磷酸钙支架具有速固化、多孔结构及较好的力学强度，对人MSCs增殖和活力无明显影响。人MSCs构建的组织工程骨在兔体内可异位成骨。兔MSCs构建的组织工程骨可修复大段骨缺损，其力学强度接近正常骨。结论：Dex及雌激素可对人MSCs成骨分化产生影响，冻存不会损害MSCs的成骨分化能力。壳聚糖-磷酸钙骨水泥理想的理化性能和细胞相容性，人MSCs与之构建组织工程骨在体内可异位成骨。兔MSCs构建组织工程骨可原位成骨修复骨缺损。干细胞组织工程技术可用于骨缺损修复。