【摘 要】
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目的:研究微小RNA-21(microRNA-21,miR-21)在视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)Weri-RB-1细胞恶性生物学行为中的影响作用,及其与同源磷酸酶-张力蛋白(PTEN)/磷脂酰肌醇-3激
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目的:研究微小RNA-21(microRNA-21,miR-21)在视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)Weri-RB-1细胞恶性生物学行为中的影响作用,及其与同源磷酸酶-张力蛋白(PTEN)/磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/AKT信号通路、p53/p21信号通路之间的关系。方法:本研究采用脂质体转染技术、实时定量PCR技术(qRT-PCR)对RB及Weri-RB-1细胞miR-21的表达水平进行检测;并通过流式细胞术、免疫蛋白印迹法对细胞凋亡比率及相关蛋白表达水平进行了研究。结果:与视网膜正常组织相比,RB组织中miR-21过表达,并具有显著差异(P<0.01)。在Weri-Rb-1细胞中,miR-21抑制剂明显降低了miR-21的水平,并降低了细胞存活率(P<0.01)。与miR-21阴性对照组(negative control,NC)相比,miR-21抑制剂增加了细胞凋亡比率,并提高了凋亡相关蛋白PDCD4和Bax的表达(P<0.01)。而且mi R-21抑制剂不仅抑制了细胞的迁移与侵袭,而且降低了MMPs的蛋白表达水平(P<0.01)。此外miR-21抑制剂还通过调节p53/p21蛋白通路,促进了细胞的周期阻滞。结论:miR-21抑制剂通过干扰PTEN/PI3K/AKT信号通路以及p53/p21蛋白通路,抑制了细胞的存活、迁移与侵袭以及细胞周期阻滞。这些实验结果表明:RB中miR-21为促癌基因,为RB的有效治疗提供了新的作用靶点与方法。
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