赤皮青冈组织培养技术研究

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赤皮青冈(Cyclobalanopsis gilva (Blume) Oerst),属壳斗科青冈属(Cyclobalanopsis Oerst)植物,耐贫瘠,分布广。赤皮青冈木材优良,用途广泛,经济价值很高,是我国珍贵的硬材树种之一。由于大量砍伐,已沦为濒危树种。方面,赤皮青冈种子容易遭虫害,不易保存,存活率很低,有性繁殖速度慢;另一方面,有性繁殖不能保证林木的优良特性,然而,组织培养能通过无性繁殖,遗传树种的优良特性,能在短时间内快速繁殖获得大量优质的组培苗,为优质种源推广提供可能。本实验所选种源来于湖南怀化,研究内容包括外植体的选择、消毒;基本培养基的选择,激素种类及浓度的选择,愈伤组织的诱导、增殖、分化,以及丛生芽的诱导,生根诱导等方面。具体研究内容及结果如下:1、外植体的消毒。对1-2年生幼苗嫩茎进行消毒处理时,先用70%酒精消毒处理15s,然后用0.1%的升汞溶液浸泡15min时灭菌效果最好;在对当年采摘的新鲜种子消毒处理时,在种子去皮前,先用70%酒精处理30s,接着用0.1%升汞溶液浸泡10min:去皮后,先用70%的酒精处理30s,后再用0.1%氯化汞溶液处理3min时,此种方法最好,种子的污染率很低,而萌发率却很高。2、愈伤组织诱导时外植体与培养基选择。通过实验对比腋芽更适合作为愈伤组织的诱导材料;通过多种基本培养基对比实验,选出最佳基本培养基为MS培养基。3、愈伤组织的诱导、增殖、分化。以6-BA和IBA为双因子开展对比实验,根据结果选出最佳诱导培养基为MS+1.0mg/L6-BA+0.2mg/LIBA;利用不同培养基进行愈伤组织的增殖和分化实验,通过对比获得了最佳增殖培养基MS+1.0mg/L6-BA+0.3mg/LIBA;最佳分化培养基为MS基本培养基并添加1.5mg/L6-BA和O.1mg/LIBA。4、丛生芽诱导与生根诱导。丛生芽的诱导包括顶芽诱导丛生芽和子叶节间诱导丛生芽。通过四因素三水平的正交实验设计并进行相关方差分析,得出顶芽诱导丛生的培养基组成是改良1/2MS+1.5mg/L6-BA+0.01mg/LIBA+0.1mg/L TDZ。子叶节间诱导丛生芽时,以改良1/2MS为基本培养基通过完全区组实验,对影响因子进行方差分析以及对各影响因子的水平进行Duncan多重比较,最后得出诱导丛生芽的培养基组成是改良1/2MS+1.5mg/L6-BA+0.1mg/LTDZ。在生根诱导方面,通过对比实验得出1/4MS+1.0mg/L6-BA+1.0mg/L的IBA效过较好。
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