棉铃虫核多角体病毒(HearNPV)是农业生物防治中广泛应用的重要病毒，在已知棉铃虫基因组序列的基础上，HearNPV基因功能的研究已经全面展开。本论文对HearNPV的orf83基因进行原核表达，制备多克隆抗体，生物软件预测其功能；随后又进行酵母真核表达，利用表达的蛋白进行生测实验初步研究其功能；并通过基因缺失试图研究其功能。　　 第一章为前言综述，首先对杆状病毒进行概述，主要介绍了杆状病毒的分类，杆状病毒的形态与结构，杆状病毒的侵染、增值及感染循环，杆状病毒的基因组特征。随后总结杆状病毒的结构蛋白基因，与病毒的转录和复制相关的基因，及杆状病毒的其它功能基因。接着介绍了杆状病毒杀虫剂的研究和应用，杆状病毒表达系统。最后简单介绍了增效蛋白的发现，特性和应用。　　 第二章首先提取HearNPV G4株基因组DNA，利用已知序列设计一对引物扩增ha83基因，将该基因连接到pET-28a载体上，并在大肠杆菌中对其进行克隆和表达，western blot分析表明杂交条带比蛋白预计分子量偏大。大量诱导表达目的蛋白并纯化后，蛋白胶回收纯化目的蛋白，免疫大白兔，生产多克隆抗体。　　 第三章在本章利用毕赤酵母表达系统真核表达HearNPV G4株orf83基因，根据酵母真核表达载体pPIC9K多克隆位点和HearNPV G4株基因组系列设计一对特异性含两个独特多克隆位点的引物，扩增orf83基因(ha83)。将orf83基因转到pPIC9K载体后，载体电转至毕赤酵母GS115菌株，筛选G418抗性多克隆子，甲醇诱导表达，SDS-PAGE和Western-blot检测表达蛋白。为了研究HA83蛋白的功能，我们将目的蛋白真核表达产物与HearNPV一起喂食棉铃虫幼虫，结果发现HA83蛋白对HearNPV的杀虫效果有明显提高。　　 第四章本章为了研究HearNPV G4株orf83基因的功能，构建了含有绿色荧光蛋白基因eGFP与多角体蛋白基因polyhedrin的缺失ha83基因的HaBacH28杆状病毒，以及一个含EGFP与PH的对照病毒和一个含eGFP与polyhedrin基因的回复ha83的对照病毒。首先扩增了eGFP基因、polyhedrin基因、ha83回复基因( tha83)和SV40 polyA加尾信号序列，随后将这些基因和序列分别构建到杆状病毒表达载体pFastBacDual上，形成pFast-eGFP-polh和pFast-eGFP-polh-SV40 polyA-rha83两个供体质粒。然后利用同源重组构建缺失ha83基因的含氯霉素抗性基因的重组Bacmid。本实验室正在利用上述供体质粒和重组杆状病毒构建HaBacH28-eGFP-polh、HaBacH28Aha83-eGFP-polh和HaBacH28-rha83-eGFP-polh三个重组杆状病毒，然后将它们转染HZAM1，观察细胞，看细胞是否有荧光出现和多角体病毒产生。