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目的：本研究将逆转录聚合酶链反应技术(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)与细胞培养(cell culture)相结合,进一步了解天津地区5岁以下住院腹泻患儿A组轮状病毒和星状病毒的感染情况及其型别特点。方法：收集天津市儿童医院2008年5月到2009年4月5岁以下住院腹泻患儿的粪便标本,用胶体金免疫层析法快速检测A组轮状病毒抗原,用酶联免疫吸附试验方法(ELISA)进行星状病毒抗原检测,将抗原检测阳性的标本经过胰酶(10μg/ml)处理分别接种于MA-104细胞株和CaCo-2细胞株,产生细胞病变(CPE)后,提取病毒RNA, RT-PCR扩增并经测序确证。测序结果利用DNASTAR和BlAST软件进行比对。同时收集其临床相关资料。结果：863例粪便标本轮状病毒抗原阳性率为28.39%(245/863)；89.39%的轮状病毒腹泻发生在24月龄以下患儿；发病高峰主要集中在2008年10月份到2009年4月份；245例轮状病毒抗原阳性标本中,男166例,女79例,男女阳性检出率之比为2.10：1；轮状病毒感染的主要临床表现为腹泻、发热、呕吐,并伴有不同程度的脱水；此外,接种的208例轮状病毒抗原阳性标本中,病毒分离后用PCR鉴定阳性95例,对其中35例PCR产物阳性标本作序列分析显示除1例为轮状病毒G9型、2例为轮状病毒G3型外,其余均为轮状病毒G1型。863例粪便标本星状病毒抗原阳性检出率为2.90%(25/863),与轮状病毒共同感染的有6例,占星状病毒抗原阳性标本的24.00%(6/25)；96.00%的星状病毒腹泻发生在2岁以下患儿,其中小于6月龄的患儿占星状阳性标本的44.00%(11/25)；星状病毒感染主要集中在2008年8月份至次年4月份,与轮状病毒流行季节相似；25例星状病毒抗原阳性标本中,男15例,女10例,男女阳性检出率之比为1.74：1,差异无显著性统计学意义(χ2=0.717,P=0.132)；星状病毒感染的主要临床表现为腹泻、发热、呕吐,仅有一例伴有轻度脱水；此外,接种的21例星状病毒抗原阳性的标本中,病毒分离后用PCR鉴定阳性11例并经测序确证均为HAstV-1型。结论：轮状病毒是天津地区婴幼儿腹泻的重要病原,流行的基因型以G1为主。星状病毒也是天津地区2008年-2009年婴幼儿病毒性腹泻的重要病原之一,流行型别以HAstV-1型为主。