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目的:(1)分析芍药甘草汤干预慢性炎性痛大鼠背根神经节变化差异显著的蛋白。(2)探讨背根神经节Sema3G及其下游因子IL-6、CCL2在芍药甘草汤治疗慢性炎性痛中的作用。方法:实验1将18只SD大鼠随机分为空白组、模型组、芍药甘草汤组,每组6只。空白组大鼠于左侧后足底注射100μl生理盐水。模型组和芍药甘草汤组大鼠于左侧后足底注射100μl CFA制备慢性炎性痛模型。空白组大鼠每天同等条件捉取。模型组大鼠术后24小时予以生理盐水灌胃,每天1次,连续7天。芍药甘草汤组大鼠术后24小时予以芍药甘草汤灌胃,每天1次,连续7天。术前及术后第1、3、5、7天,用Von-Frey测痛仪检测机械刺激缩足阈值。术前及术后第3、5、7天,用热辐射测痛仪检测热缩足潜伏期。术后第7天采用全蛋白4D Label free定量蛋白质组学检测大鼠背根神经节总体蛋白表达。采用免疫印迹法检测大鼠背根神经节Sema3G蛋白相对表达水平。采用实时荧光定量PCR检测大鼠背根神经节IL-6、CCL2 mRNA相对表达水平。实验2将18只SD大鼠随机分为空白组、模型+空载病毒组、模型+病毒过表达组。空白组大鼠造模前4周正常饲养,不予鞘内注射。模型+空载病毒组大鼠造模前4周鞘内注射空载病毒60μl。模型+病毒过表达组大鼠造模前4周鞘内注射Sema3G过表达病毒60μl。病毒注射4周后进行造模。空白组大鼠于左侧后足底注射100μl生理盐水。模型+空载病毒组大鼠、模型+病毒过表达组大鼠于左侧后足底注射100μl CFA制备慢性炎性痛模型。术前及术后第1、3、5、7天,用Von-Frey测痛仪检测机械刺激缩足阈值。术前及术后第1、3、5、7天,用热辐射测痛仪检测热缩足潜伏期。术后第7天采用实时荧光定量PCR检测大鼠背根神经节IL-6、CCL2 mRNA相对表达水平。结果:实验一:芍药甘草汤对慢性炎性痛大鼠痛行为学、背根神经节总体蛋白和Sema3G蛋白,IL-6、CCL2 mRNA相对表达水平影响(1)芍药甘草汤对慢性炎性痛大鼠机械刺激缩足阈值的影响:术后第7天,与空白组比较,模型组大鼠机械痛阈值显著降低(P<0.05);与模型组大鼠比较,芍药甘草汤组大鼠机械痛阈值显著升高(P<0.05)。(2)芍药甘草汤对慢性炎性痛大鼠热缩足潜伏期的影响:术后第3天,与空白组比较,模型组大鼠热缩足潜伏期显著降低(P<0.05);芍药甘草汤组干预第3、5天与模型组大鼠比较,芍药甘草汤组大鼠热缩足潜伏期显著升高(P<0.05)。(3)芍药甘草汤对慢性炎性痛大鼠背根神经节蛋白质组学的影响:术后第7天,与空白组大鼠比较,模型组大鼠背根神经节有52种蛋白显著升高,17种蛋白显著下降;与模型组大鼠比较,芍药甘草汤组大鼠背根神经节有212种蛋白显著升高,515种蛋白显著下降(P<0.001)。(4)芍药甘草汤对慢性炎性痛大鼠背根神经节Sema3G蛋白相对表达水平的影响:术后第7天,与空白组比较,模型组大鼠背根神经节Sema3G蛋白相对表达水平显著下降(P<0.05);与模型组比较,芍药甘草汤组大鼠背根神经节Sema3G蛋白相对表达水平显著升高(P<0.05)。(5)芍药甘草汤对慢性炎性痛大鼠背根神经节IL-6、CCL2 mRNA相对表达水平的影响:与空白组比较,模型组大鼠背根神经节IL-6 mRNA相对表达水平显著上升(P<0.05);与模型组比较,芍药甘草汤组大鼠背根神经节IL-6 mRNA相对表达水平显著降低(P<0.05)。与空白组比较,模型组大鼠背根神经节CCL2mRNA相对表达水平显著上升(P<0.05);与模型组比较,芍药甘草汤组大鼠背根神经节CCL2 mRNA相对表达水平显著降低(P<0.05)。实验二:鞘内注射Sema3G过表达病毒对慢性炎性痛大鼠痛行为学,背根神经节IL-6、CCL2 mRNA相对表达水平的影响(1)鞘内注射Sema3G过表达病毒对慢性炎性痛大鼠机械刺激缩足阈值的影响:造模后,与空白组比较,模型+空载病毒组大鼠机械刺激缩足阈值显著降低(P<0.05);造模后第7天,与模型+空载病毒组大鼠比较,模型+病毒过表达组大鼠机械刺激缩足阈值显著升高(P<0.05)。(2)鞘内注射Sema3G过表达病毒对慢性炎性痛大鼠热缩足潜伏期的影响:造模后与空白组比较,模型+空载病毒组大鼠热缩足潜伏期显著降低(P<0.05);造模后第3、5、7天,与模型+空载病毒组大鼠比较,模型+病毒过表达组大鼠热缩足潜伏期显著升高(P<0.05)。(3)鞘内注射Sema3G过表达病毒对慢性炎性痛大鼠背根神经节IL-6、CCL2 mRNA相对表达水平的影响:与空白组比较,模型+空载病毒组大鼠背根神经节IL-6 mRNA相对表达水平显著上升(P<0.05);与模型+空载病毒组比较,模型+病毒过表达组大鼠背根神经节IL-6 mRNA相对表达水平显著降低(P<0.05)。与空白组比较,模型+空载病毒组大鼠背根神经节CCL2 mRNA相对表达水平显著上升(P<0.05);与模型+空载病毒组比较,模型+病毒过表达组大鼠背根神经节CCL2 mRNA相对表达水平显著降低(P<0.05)。结论:(1)芍药甘草汤可改善慢性炎性痛大鼠机械刺激缩足阈值和热缩足潜伏期。(2)芍药甘草汤可能通过上调背根神经节Sema3G表达,抑制IL-6、CCL2mRNA相对表达水平,改善慢性炎性痛。