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【目的】
研究辣椒素(Capsaicinoids)联合盐酸伊立替康(CPT-11)对人结肠癌细胞SW480凋亡抑制作用。探讨辣椒素（Capsaicinoids）联合盐酸伊立替康(CPT-11)诱导结肠癌细胞凋亡的作用机制。
【方法】
1、将SW480结肠癌细胞置于10％胎牛血清+RMPI-1640液+100U/ml青霉素+100U/ml链霉素的培养液中，调整细胞浓度为1×106/ml,培养于37℃含5％C02和饱和湿度条件下的培养箱中。分别加入终浓度为0、50、100、200μnol·L-1的辣椒素，于24、48、72小时行Cellcountingkit-8检测不同浓度辣椒素对SW480细胞的生长抑制作用，估计细胞生存活力，测定细胞凋亡率，从而筛选出辣椒素及伊立替康诱导SW480细胞发生凋亡的理想浓度和理想时间。
2、根据以上的实验结果，观察辣椒素以及辣椒素联合伊立替康对细胞凋亡的诱导，将实验分为四组：空白对照组、辣椒素组、辣椒素联合伊立替康组、伊立替康组，其中辣椒素的浓度为100μmol·L-1，伊立替康的浓度为10μmol·L-1。采用流式细胞术(AnnexinV/PI)方法，检测药物对细胞凋亡的影响。进一步行分光光度法检测Casepase-3酶活性、免疫细胞化学及蛋白免疫印迹法(Western-blot法)检测蛋白Casepase-3和HSP27的表达，探讨辣椒素联合伊立替康诱导SW480细胞发生凋亡的机制。
【结果】
1、不同浓度的辣椒素作用不同时间后细胞活力和凋亡率有明显差异，其中50μmol·L-1、48h凋亡率达20.3±4.1％，100μmol·L-1、48h凋亡率达39.8±6.5％，200μmol·L-1、48h凋亡率达68.6±7.2％；故选用100μmol·L-1、48h做为下一步实验的基础。伊立替康在10μmol/L以下，不同时间对于细胞的凋亡无明显差异，故选用10μmol·L-1、48h作为联合用药的条件。在此条件下应用流式细胞仪检测早期凋亡，药物干预作用24h后，辣椒素组的凋亡率为10±1.7％，辣椒素联合伊立替康组的凋亡率为50±4.9％，两组有明显差异(P＜0.05)，且均高于对照组和伊立替康组。对照组与伊立替康组比较无明显差异(P＞0.05)。较无明显差异(P＞0.05)。空白对照组HSP27蛋白呈现高表达，辣椒素组HSP27表达水平降低，联合组HSP27表达较辣椒素组更低(P＜0.05)。伊立替康组HSP27表达与对照组比较无明显差异(P＞0.05)。
【结论】
1、辣椒素能显著抑制人结肠癌SW480细胞的生长。
2、盐酸伊立替康对人结肠癌SW480细胞的细胞生长的抑制作用尚不明显。
3、辣椒素联合盐酸伊立替康能够促进人结肠癌SW480细胞的凋亡。
4、辣椒素联合盐酸伊立替康促进人结肠癌SW480细胞凋亡的作用机制与降低HSP27蛋白的表达，上调Caspase-3蛋白的表达有关。