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本论文通过对纸层析法、高锰酸钾滴定法和高效液相色谱的比较,建立了HPLC-ELSD直接检测β-丙氨酸的新方法。该方法色谱条件为:色谱柱为5μm Alltech氨基柱,柱温为40℃,流动相为甲醇:水=5:1,流速为1.0mL/min,检测器为蒸发光散射检测器Alltech2000(U.S.A.),检测器工作条件为飘移管温度85℃,气体流速2.2L/min。从全国8个地点采集土壤,筛选到26株耐丙烯酸菌株。将26株菌株和藤黄八叠球菌(Sarcine luted)同时发酵、转化后比较产β-丙氨酸合成酶能力,结果藤黄八叠球菌转化得到的β-丙氨酸含量为0.102g/L,高于其他26株菌株。对藤黄八叠球菌进行(60)Coγ射线诱变和紫外诱变,在高浓度丙烯酸培养基和发酵残液培养基上培养,筛选得到β-丙氨酸合成酶产生菌TH0517A,β-丙氨酸合成酶活力为20.5U,较诱变前提高酶活28.97%。采用单因素及正交实验法,对诱变株TH0517A酶合成条件进行优化,优化后的酶合成条件:可溶性淀粉2.3g,硝酸钾0.8g,H3BO33.4μg,ZnSO4 8.1μg,MgSO4·7H2O 0.02g,KH2PO4 0.7g,NaCl 0.145g,定容100mL,NaOH调pH 7.0,发酵温度30℃,转速200 r/min,发酵时间18h。通过对酶合成条件的优化,突变株TH0571A酶活达到了54.4U,较优化前提高了200.41%。对转化工艺条件进行单因素优化实验,优化后的工艺条件为:二级发酵液发酵完毕后,直接作为酶液使用;转化液配方:6%丙烯酸,1%10-5mol/LZnSO4,1%10-5mol/L CuSO4,0.02%MgSO4.7H2O,配置方法:添加丙烯酸后,用0.1%Ca(OH)2调节pH值至7.0,冷却至室温,然后添加各种离子,最后氨水调pH值至10.0。转化时每15mL转化液添加9mL发酵液,30℃转化10h。实验结果显示,突变株TH0571A转化率达到了1.25%,较优化前提高了138%。采用戊二醛交联壳聚糖固定化方法,对β-丙氨酸合成酶进行固定。将壳聚糖凝胶与质量分数为0.4%的戊二醛混合,室温下搅拌交联3h,水洗至无戊二醛,以每克干壳聚糖添加40mL酶液将粗酶液添加到交联好的壳聚糖凝胶中,0℃固定化2h,抽滤洗涤后即得固定化β-丙氨酸合成酶。该方法酶活回收率达到43.16%。