129Sv小鼠实验性变应性鼻炎模型的构建及H2-Eb1基因在变应性鼻炎小鼠鼻黏膜中表达的实验研究

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目的:(1)构建129Sv小鼠的实验性变应性鼻炎模型;(2)利用129Sv小鼠变应性鼻炎模型研究H2-Eb1基因(人类HLA-DRB1基因的同源基因)在变应性鼻炎小鼠鼻黏膜中的表达并与正常小鼠比较。方法:(1)选取8周雌性129/sv小鼠36只随机分成实验组、对照组,每组18只。采用卵清蛋白(ovalbumin, OVA)致敏激发,建立小鼠变应性鼻炎模型,最后一次激发后取鼻腔黏膜固定后染色评估小鼠鼻黏膜嗜酸性粒细胞、肥大细胞浸润等病理学变化,酶联免疫法(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, ELISA)检测小鼠血清白细胞介素4(interleukin, IL-4)和IFN-y细胞因子水平和OVA特异性IgE抗体浓度评估造模后小鼠相关血清中生化因子变化;(2)以免疫组化(immunohistochemistry)、免疫荧光(immunofluorescence technic)及蛋白印迹(Western Blot)法检测小鼠鼻黏膜H2-EB1蛋白表达情况,提取鼻黏膜中RNA行实时荧光定量PCR(Quantitative Real Time PCR)检测H2-Eb1mRNA表达情况。结果:(1)构建129Sv实验性变应性鼻炎小鼠模型后,与对照组相比,实验组鼻腔黏膜纤毛层部分脱落,黏膜下可见嗜酸性粒细胞及肥大细胞浸润,血清中OVA-SIgE、IL-4浓度显著增高,IFN-y浓度降低(均P<0.05);(2)鼻黏膜组织H2-Eb1mRNA、H2-EB1蛋白表达水平较对照组均增高。结论:(1)成功构建出稳定的129Sv小鼠实验性变应性鼻炎模型,小鼠体内出现Th1/Th2细胞因子失衡;(2)H2-Eb1mRNA及H2-EB1蛋白在变应性疾病中表达增高,提示HLA-DRB1基因在变应性鼻炎发病机制中的Th1/Th2失衡可能起到重要的调节作用。
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