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目的:研究CD24 mRNA及其蛋白产物在胃癌原发灶、癌旁粘膜及区域淋巴结中的表达情况,结合临床病理特征,初步探讨CD24在胃癌发生、转移中的作用,为胃癌的进展及预后提供新的分子标志。
材料与方法:
第一部分
采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测CD24mRNA在胃癌原发灶、癌旁粘膜和区域淋巴结中的表达情况并进行半定量分析,分析胃癌原发灶中CD24mRNA的表达和患者临床病理特征及预后之间的关系。
第二部分
采用免疫组化的方法,检测CD24蛋白在胃癌原发灶、癌旁粘膜和区域淋巴结中的表达情况,分析胃癌原发灶中CD24蛋白表达和患者临床病理特征及患者预后之间的关系。
研究结果:
第一部分
1.164例标本都成功提取到总RNA;CD24mRNA和β-actin(作为内参照)在所有组织中都有表达扩增。癌灶中的平均表达量为0.879,癌旁粘膜中的平均表达量为0.823;癌组织高于癌旁粘膜,两者有统计学差异(P<0.05)。在收集到的淋巴结中,转移淋巴结中CD24 mRNA的平均表达量为0.874,非转移淋巴结中的平均表达量为0.770,转移淋巴结高于非转移淋巴结,两者有统计学差异(P<0.05)。
2.CD24 tuRNA的相对表达量在不同分期、分级的胃癌之间无明显统计学差别(P>0.05)和胃癌的浸润深度、淋巴结转移、肿瘤大小及神经、脉管浸润之间亦无统计学差异(P>0.05)。
3.淋巴结转移和TNM分期与患者无病生存率相关(P<0.05),有淋巴结转移和晚期(Ⅲ-Ⅳ期)的患者无病生存率低。临床特征,如肿瘤大小、浸润深度、分化程度、分期等和总生存率无关;癌灶中CD24mRNA的表达和患者无病生存率及总生存率无关(P>0.05)。
第二部分
1.CD24蛋白在细胞膜和细胞浆中都有表达呈棕黄色弥漫性分布,主要分布于癌组织中,癌旁粘膜中表达量较少,癌灶中表达量较癌旁粘膜中高。以癌组织免疫组化指数和癌旁粘膜免疫组化指数之比≥2作为高表达计算,癌组织高表达率为58.2%。
2.胃癌原发灶中CD24蛋白表达高于癌旁粘膜(P<0.05);转移淋巴结中CD24蛋白的表达量较未转移淋巴结中高(P<0.05)。
3.男性患者癌灶中CD24的表达量高于女性患者,两者之间有统计学差异(P<0.05),有淋巴结转移的患者高于无淋巴结转移的患者。而CD24的表达和病理分级、分期、浸润深度、肿瘤大小等之间不相关。
4.淋巴结转移和TNM分期与患者无病生存率相关((P<0.05)),有淋巴结转移和晚期(Ⅲ-Ⅳ期)的患者无病生存率低。临床特征,如肿瘤大小、淋巴结转移、分化程度、分期等和总生存率无关;未发现CD24的表达和患者总生存率及无病生存率的关系。
结论:
1.CD24不管在基因水平还是在蛋白水平胃癌原发灶中的表达都高于癌旁粘膜。转移淋巴结中CD24的表达在基因和蛋白水平上都高于未转移淋巴结。有淋巴结转移组CD24的表达高于无淋巴结转移组,CD24可能是参与胃癌发生及浸润转移的一个重要分子。
2.CD24蛋白的表达和性别相关,男性中CD24的表达高于女性,CD24的表达可能和性激素的表达相关,雌激素可能抑制了CD24的表达。
3.CD24能否作为胃癌复发、转移和预后的分子标志仍需进一步研究。