【摘 要】
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昆虫的抗药性一直是害虫化学防治中的突出问题.细胞色素P450与昆虫抗药性有密切关系,这已成为这一领域内的研究热点.该研究根据果蝇的CYP4D1保守区氨基酸序列,设计了一对简并
【出 处】
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中山医科大学 中山大学中山医学院 中山大学
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昆虫的抗药性一直是害虫化学防治中的突出问题.细胞色素P450与昆虫抗药性有密切关系,这已成为这一领域内的研究热点.该研究根据果蝇的CYP4D1保守区氨基酸序列,设计了一对简并引物,运用这对引物从致倦库蚊、中华按蚊、白纹伊蚊、家蝇和洲大蠊五种昆虫体内均扩增出了与设计大小相符的片段.将有关片段经凝胶电泳回收后,通过构建T载体克隆到pUC18质粒,并转入DH5a大肠杆菌中.重组质粒经酶切和PCR鉴定后,用Sanger双脱氧链终止法自动测序,得到了CUL1、CUL2(致倦库蚊),ADE1、ADE2(白纹伊蚊),ANO1、ANO2(中华按蚊)和MUS1(家蝇)共七条测序结果良好的核酸序列.该研究运用PCGENAE软件对该研究的序列资料和目前已知的昆虫P450序列进行同源性分析,构建了昆虫P450的种系发生树.该研究还尝试通过以CYP4J片段为DIG探针,与致倦库蚊溴氰菊酯抗生株和敏感株各期的mRNA进行斑点杂交,研究该基因在两株生活史各期的表达量变化情况,并对两株同期表达量进行比较.结果显示:两株中该基因的表达量增以幼虫期为最高,蛹期最低,而两株同期的表达量未见明显差异,它与抗性的关系不有待进一步研究.
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