论文部分内容阅读
目的：检测脂联素基因APM1启动子区-11377C>G(rs266729)、第二外显子区+45T>G(rs2241766)、第二内含子区(IVS2)+712A>G(rs3774261)及3’非翻译区+4545G>C(rs1063539)4个候选单核苷酸多态位点（SNPs）的基因型、等位基因及单倍型在妊娠高血压组和正常妊娠组中的频率，探明其在福建汉族女性人群中的分布；探索APM1基因与妊娠高血压疾病发生、发展的相关性，并揭示研究中4个基因多态位点在妊娠期高血压疾病脂代谢异常中的作用，为妊娠高血压疾病的预防、预测、治疗及未来可能的临床个体化治疗和基因治疗提供有价值的基础研究资料。方法：本实验为case-control研究，共选取研究对象492例，均为福建地区汉族人群，其中妊娠高血压患者组221例，正常妊娠组271例。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测APM1基因4个单核苷酸多态位点在中国福建地区汉族妇女中的基因型和等位基因频率分布，通过关联血脂等临床资料探索4个SNPs位点与妊娠期高血压疾病及脂代谢的遗传相关性。数据统计分析采用SHEsis在线分析软件和SPSS17.0软件包。结果：(1)妊高征组和正常妊娠组APM1基因各位点基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡定律，p值均大于0.05，所选取样本具有一定的群体代表性。(2)妊高征组APM1基因4个SNPs位点的多态性频率分布①-11377C>G多态位点的分布情况：CC、CG、GG基因型频率分别为56.6%、36.7%、6.8%，等位基因频率C为74.9%、G25.1%；②+45T>G位点TT、TG、GG基因型频率分别为44.5%、46.3%、9.2%，等位基因频率为T67.7%、G32.3%；③+712A>G位点AA、AG、GG基因型频率分别为29.7%、54.7%、15.6%，等位基因频率为A57.1%、G42.9%；④+4545G>C位点CC、CG、GG基因型频率分别为9.6%、45.2%、45.2%，等位基因频率为C32.2%、G67.8%。(3)正常妊娠组APM1基因4个SNPs位点的多态性频率分布①-11377C>G多态位点的分布情况：CC、CG、GG基因型频率分别为56.5%、38.4%、5.2%，等位基因频率C为75.6%、G24.4%；②+45T>G位点TT、TG、GG基因型频率分别为43.5%、46.1%、10.3%，等位基因频率为T66.6%、G33.4%；③+712A>G位点AA、AG、GG基因型频率分别为34.3%、48.3%、17.3%，等位基因频率为A58.5%、G41.5%；④+4545G>C位点CC、CG、GG基因型频率分别为10.3%、43.9%、45.8%，等位基因频率为C32.3%、G67.7%。(4)通过SPSS17.0软件包，对研究中APM1基因4个SNPs的基因型和等位基因频率进行比较，妊高征组和正常妊娠组之间无显著性差异(p>0.05)。(5) APM1基因4个SNPs的基因型与血脂水平的关联分析，发现+45T>G位点G携带基因型(TG+GG)对应的ApoA1、TC、HDL-c水平明显高于TT型，差异有统计学意义(p=0.002，0.045，0.033)。(6)利用SHEsis软件进行SNPs位点间两两配对连锁不平衡分析，发现-11377C>G与+45T>G、+45T>G与+712A>G、+45T>G与+4545T>G、+712A>G与+4545T>G均呈现较强的连锁不平衡关系；对4组2SNPs构建的单倍型进行比较，妊高征组与正常妊娠组单倍型频率差异无显著性(p>0.05)。(7)妊高征组和正常妊娠组之间经多因素logistic回归分析，结果显示收缩压、BMI指数、TG、ApoA1、ApoB及+4545G>C进入方程，经校正其它混杂因素产生的影响后，血脂(TG、ApoA1、ApoB相应p=0.025，0.034，0.007；OR=1.592，0.085，0.006)及多态位点+4545G>C (p=0.038，OR=3.767)与妊娠高血压的发病显著相关，反映了妊娠高血压疾病存在环境因素与遗传因素之间的交互作用。结论：(1)在中国福建地区汉族妇女群体中存在APM1基因上述4种单核苷酸多态性，本研究已初步探明各相关位点在福建地区汉族女性当中基因型和等位基因频率的分布情况；(2)本研究中APM1基因4个SNPs位点(-11377C>G、+45T>G、+712A>G及+4545G>C)之间存在较强的连锁不平衡关系，且+45T>G位点T>G等位基因突变可能与妊高征患者血脂异常增高有关，+45G等位基因可能是HDCP患者脂质代谢异常的一个危险遗传因素；(3) APM1基因+4545G>C位点与妊高症的发病关系密切，其等位基因C>G多态性突变可能是妊娠高血压疾病发病的危险遗传因素，但其与各种环境因素之间的具体相互作用机制仍有待深入研究；(4) APM1基因与妊娠期高血压疾病脂代谢关联，与环境因素一起影响血脂水平，但其在妊高征发生中的具体作用仍有待于进一步研究确定。