bFGF在MSCs联合EPCs体外培养血管样组织过程中的作用研究

来源 :石河子大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ghmyjp
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目的:  1. 探讨间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)联合内皮祖细胞(Endothelial progenitor cells, EPCs)能否在体外培养出血管样组织,以及两种干细胞联合应用是否优于单种细胞应用。  2. 探讨碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF) 能否促进这两种干细胞联合培养血管样组织的过程。  方法:  1. 分离、培养及扩增来源于4-6周龄C57BL/6小鼠骨髓的MSCs和EPCs;  2. 剪裁、消毒、鼠尾胶原包埋聚乙醇酸(Polyglycolic acid,PGA)支架材料;  3. 实验分组:EPCs组、MSCs组、联合组(EPCs+MSCs)、bFGF组(EPCs+MSCs+bFGF)。按实验分组将各组细胞分别接种到PGA支架上,制成细胞-PGA复合物后在体外培养;  4. 体外培养1周时分别用光学显微镜及HE染色观察细胞与PGA的相容性;  5. 体外培养8周,终止培养,石蜡包埋,进行HE与免疫组织化学染色(CD34、α-SMA),病理专家对染色结果进行评分;  6. 使用SPSS 20.0分析软件分析各组之间免疫组织化学染色的差异。  结果:  1. 体外培养1周时,大量细胞粘附在PGA支架纤维上,细胞与PGA相容性良好。  2. 体外培养8周时,联合组、EPCs组与bFGF组的CD34免疫组织化学染色均为阳性,MSCs组为阴性,联合组评分明显高于EPCs组,差异有统计学意义(p<0.01),联合组与bFGF组CD34染色评分无明显差异 (p>0.05)。  3. 体外培养8周时,各分组的α-SMA免疫组织化学染色均为阴性。  结论:  1. MSCs联合EPCs可以在体外培养出血管样组织,并优于单种细胞的培养。  2. bFGF在MSCs联合EPCs体外培养血管样组织过程中没有明显的促进作用。
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