MTA1靶向shRNA对裸鼠喉鳞癌移植瘤生长和转移能力的影响

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目的:喉癌的发病率约是全身恶性肿瘤的5%,是最常见的头颈部癌症之一,其组织学类型95%是鳞状细胞癌。对喉癌患者最终结果的主要影响是肿瘤复发和转移,而淋巴结转移是喉癌患者复发和死亡的常见原因,也是喉癌最重要的转移途径。肿瘤转移相关基因1(metastasis-associated gene 1, MTA1)最初是大鼠乳腺癌转移灶筛选出的肿瘤转移相关基因。其对乳腺癌转移能力有促进作用,因此被命名为肿瘤转移相关基因。在人类恶性肿瘤如肺癌、卵巢癌、胃癌、骨肉瘤等中表达量增加,在mRNA水平的高表达与肿瘤的侵袭和淋巴结转移相关。本试验通过RNA干扰(RNAi)技术,观察肿瘤转移相关基因1对裸鼠喉鳞癌移植瘤生长和转移能力的影响。方法:构建MTA1 shRNA1侵病毒干扰载体,进行包装与转染Hep-2细胞。将阴性对照组和MAT1 shRNA感染的Hep-2细胞接种于裸鼠爪垫,每组5只。复制人喉癌移植瘤淋巴转移模型,9周后处死裸鼠,取下肿瘤组织及腹股沟淋巴结,进行形态学学检测。反转录PCR检测MTA1、β连环素(β-catenin)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1) mRNA的水平,Western blot法检测MTA1、β-catenin、 MMP-9、 CyclinDl蛋白水平。结果:慢病毒MTA1干扰载体筛选成功;2组人喉癌裸鼠爪垫移植瘤100%成瘤:MAT1 shRNA转染细胞裸鼠肿瘤体积在同一时间点均明显小于阴性对照组;MAT1 shRNA转染细胞5只裸鼠爪垫肿瘤未发现淋巴结转移;阴性对照组5只裸鼠腹股沟淋巴结切片均可见喉癌细胞;与阴性对照组相比,MAT1 shRNA转染细胞MTA1、β-catenin、MMP-9、CyclinD1的mRNA和蛋白水平明显降低。结论:抑制MTA1基因能够减缓裸鼠喉鳞癌的生长并降低其转移能力,其机制可能与MTA1影响β-catenin、Cyclin D1、MMP-9的表达水平有关。
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