【摘 要】
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阿尔茨海默症(AD)是一种严重的神经退行性疾病,目前临床上可以通过EEG脑电信号、医学影像学、脑组织构筑学等方式对其进行检测,但是这些方法各有利弊,现下尚无符合理想的单一检测手段。细胞内神经元纤维缠结是AD典型的病理学变化之一,目前广泛认为糖原合成酶激酶-3β3(GSK-3ββ)是AD的关键参与者,但很多科学家对此持不同意见,他们认为支撑此结论的数据并不完全可靠。因此,对这个激酶的检测不仅是预防和
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阿尔茨海默症(AD)是一种严重的神经退行性疾病,目前临床上可以通过EEG脑电信号、医学影像学、脑组织构筑学等方式对其进行检测,但是这些方法各有利弊,现下尚无符合理想的单一检测手段。细胞内神经元纤维缠结是AD典型的病理学变化之一,目前广泛认为糖原合成酶激酶-3β3(GSK-3ββ)是AD的关键参与者,但很多科学家对此持不同意见,他们认为支撑此结论的数据并不完全可靠。因此,对这个激酶的检测不仅是预防和治疗AD的潜在选择,也为厘清AD的具体发病机制提供了一种新思路。目前检测GSK-3β方法有免疫印迹法、实时荧光定量法、ELISA法、质谱法、同位素标记法等,这些方法虽然有效但是存在价格昂贵、过程繁琐等问题,因此开发一种新技术对于阿尔兹海默症患者体内GSK-3β的检测具有重要的研究意义。本文报道了一种新颖的免标记的电化学发光(ECL)生物传感器,用于检测GSK-3β。此传感器由两步法制成,主要利用Zr4+能特异性结合两个磷酸根的特点完成传感,所以技术上来讲更简易可行。我们把磷酸化的聚乙烯醇(PPVA)与Zr4+之间形成的聚合物配位层作为传感器的主体基质,由于GSK-3β3能催化蛋白质分子磷酸化,传感器表面的Zr4+就可以通过配位作用进一步与磷酸化的蛋白质结合。检测过程中使用鲁米诺作为ECL探针,在优化条件下,所得传感器的电化学发光强度(△I)与GSK-3β的浓度相关,并且与其对数成线性关系,响应范围为0.5 ng L-1至91.5 ng L-1,检出限为0.055 ng L-1。该生物传感器线性范围宽,重现性和稳定性好,检出限低,且其制备简单,成本低,适合一次性使用。这对于阿尔茨海默症(AD)无疑具有重要的研究意义。
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