槲皮素对牙龈卟啉单胞菌激活的巨噬细胞极化调控的初步探讨

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实验目的:种植体周围炎是一种类似于牙周炎的口腔慢性炎症性疾病,在疾病的发展过程中伴有巨噬细胞的极化。巨噬细胞是机体重要的防御细胞,在不同的刺激因素的作用下,巨噬细胞会呈现出两种具有不同表型和生理功能的分化状态。M1型巨噬细胞可释放IL-1、TNF-α、i NOS等炎性细胞因子,这些细胞因子赋予M1巨噬细胞强烈的细胞毒性及组织损伤性,在杀灭病原微生物的同时,也会造成结缔组织的降解和骨组织的破坏吸收;M2型巨噬细胞则可释放IL-10、Arg-1等抗炎细胞因子,可促进机体损伤组织的修复重建。槲皮素属于黄酮醇类化合物,具有抗炎作用。本实验的目的在于初步探究槲皮素是否对巨噬细胞的极化具有调控作用,能否通过抑制巨噬细胞的M1型极化,进而减少炎性细胞因子的产生和释放,为实现抑制种植体周围炎的发展提供理论基础。实验方法:1.Real-time PCR法检测牙龈卟啉单胞菌内毒素刺激RAW264.7小鼠巨噬细胞24h时后,i NOS及Arg-1m RNA的相对表达水平。2.槲皮素预处理RAW264.7小鼠巨噬细胞2h后,Real-time PCR法检测i NOS及Arg-1m RNA的相对表达,ELISA法检测TNF-α及IL-10的表达。3.实验结果均采用Graph Pad Prism软件,单因素方差分析法分析。实验结果:1.牙龈卟啉单胞菌内毒素刺激RAW264.7小鼠巨噬细胞24h后,i NOS的m RNA表达显著增加,而Arg-1的m RNA表达微量增加,无统计学差异。2.槲皮素预处理RAW264.7小鼠巨噬细胞2h后,i NOS的m RNA及TNF-α的表达均显著降低,而Arg-1的m RNA及IL-10的表达水平均没有显著性变化。结论:实验证实了槲皮素通过抑制P.g LPS激活的RAW264.7向M1极化,减少了炎性细胞因子的释放。
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