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雪莲果(Smallanthus sonchifolius)为菊科向日葵属双子叶草本植物,原产于南美安第斯山区。雪莲果植株富含多糖类、黄酮类、酚酸类和挥发油类等多种活性成分,具食用、药用和环境保护综合开发利用的价值。目前,市场上雪莲果供不应求,而雪莲果的推广种植却受到种源限制。因而我们开展了雪莲果试管块根的离体诱导试验,同时借助SSH技术构建了雪莲果离体块根发育相关基因的消减文库。主要研究结果如下: (1)以叶片为外植体,采用正交设计研究蔗糖、NAA和BA对雪莲果试管块根诱导的影响。结果表明:NAA对叶片诱导试管块根影响显著,其次为蔗糖和NAA;筛选得到叶片诱导雪莲果试管块根的最优培养基为:MS+BA3 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1+蔗糖70 g·L-1。 (2)以茎段为外植体,采用正交设计研究蔗糖、NAA和BA对雪莲果试管块根诱导的影响。结果表明:蔗糖对茎段诱导雪莲果试管块根影响显著,其次为BA和NAA;筛选得到茎段诱导试管块根的最优培养基为:MS+BA3 mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1+蔗糖70 g·L-1。 (3)以雪莲果试管块根为研究模型,取未膨大期的不定根为对照组,膨大期(10 d,15 d,20 d)的块根为试验组,通过抑制差减杂交技术构建了与雪莲果块根发育相关的差减文库。经初步筛选和测序获得97个有效EST片段,利用GO分类标准对ESTs从细胞组分,生物过程和分子功能进行了2级水平分类。选取11个差异表达基因用Real-time PCR检测分析,证明其在块根快速形成期均出现不同程度上调,推测可能与块根发育密切相关。