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氨基酸是体外培养液的重要成分,目前应用的多种培养液中都含有必需／非必需氨酸,但是很少有针对单一氨基酸或联合添加几种氨基酸对胚胎发育影响的研究报道。本实验主要研究了培养液中添加谷氨酰胺、牛磺酸、谷氨酸、丙氨酸、脯氨酸、甘氨酸、精氨酸以及谷氨酰胺与牛磺酸联合添加对重组胚卵裂、8-16C发育及囊胚发育的影响,以期从中探寻氨基酸是否能够提高延边黄牛体细胞克隆效率。本次实验是在体外培养液中分别添加以上几种不同种类不同浓度的氨基酸,对延边黄牛体细胞克隆重组胚进行体外培养,然后观察重组胚的发育情况。实验得出的结果如下：1.在体外培养液中添加不同浓度的谷氨酰胺对延边黄牛体细胞克隆重组胚发育的影响的试验中,添加1.0 mmol/L谷氨酰胺组的重组胚的卵裂率、8-16C发育率均高于其他浓度,囊胚率显著高于其他浓度组(P<0.05),所以确定1.0mmol/L是单独应用谷氨酰胺时最适合延边黄牛卵母细胞体细胞克隆重组胚发育的最佳浓度。2.在体外培养液中添加不同浓度的牛磺酸对延边黄牛体细胞克隆重组胚发育的影响的试验中,添加7mmol/L和14 mmol/L牛磺酸组的重组胚的卵裂率高于其它浓度组,8-16C发育率和囊胚发育率显著高于其它浓度组(P<0.05),但7mmol/L组在重组胚的卵裂率、8-16C发育率、囊胚发育率上均高于14mmol/L组。所以确定7mmol/L是单独应用牛磺酸时最适合延边黄牛卵母细胞体细胞克隆重组胚发育的最佳浓度。3.在体外培养液中同时添加谷氨酰胺和牛磺酸对延边黄牛体细胞克隆重组胚发育的影响的试验中,仅有重组胚的卵裂率略高于单独添加组,而囊胚发育率上联合添加组显著低于单独应用组(P<0.05)。4.在体外培养液中添加不同浓度的谷氨酸对延边黄牛体细胞克隆重组胚发育影响的试验中,各浓度组之间重组胚的卵裂率和8-16C发育率差异不显著,囊胚发育率上6.4mmol/L.组显著高于其它浓度组(P<0.05),所以确定6.4mmol/L是单独应用谷氨酸时最适合延边黄牛卵母细胞体细胞克隆重组胚发育的最佳浓度。5.在体外培养液中添加不同浓度的精氨酸对延边黄牛体细胞克隆重组胚发育影响的试验中,各浓度组之间重组胚的卵裂率和8-16C发育率差异不显著,囊胚发育率上0.061mmol/L浓度组显著高于对照组(P<0.05),各实验组之间差异小显著,但是0.061mmol/L组的囊胚发育率高于其它实验组,所以确定0.061mmol/L是单独应用精氨酸时最适合延边黄牛卵母细胞体细胞克隆重组胚发育的最佳浓度。6.在体外培养液中添加不同浓度的甘氨酸对延边黄牛体细胞克隆重组胚发育影响的试验中,各浓度组之间重组胚的卵裂率和8-16C发育率差异不显著,囊胚发育率上7mmol/L组显著高于对照组和最高浓度组(21mmol/L,P<0.05),略高于14mmol/L浓度组,所以确定7mmol/L是单独应用甘氨酸时最适合延边黄牛卵母细胞体细胞克隆重组胚发育的最佳浓度。7.在体外培养液中添加不同浓度的丙氨酸对延边黄牛体细胞克隆重组胚发育影响的试验中,0.586mmol/L浓度的丙氨酸可以促进重组胚的卵裂,显著高于对照组(P<0.05),各浓度组之间的8-16C发育率上差异不显著,1.172 mmol/L浓度的丙氨酸能够促进囊胚的发育,显著高于对照组(P<0.05),更适合延边黄牛体细胞克隆重组胚的体外培养。8.在体外培养液中添加不同浓度的脯氨酸对延边黄牛体细胞克隆重组胚发育影响的试验中,各组的卵裂率、8-16C发育率、囊胚率之间差异不显著,但是0.143mmol/L浓度组较其它组更适合延边黄牛体细胞克隆重组胚的体外培养。