【摘 要】
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目前构建的可降解淀粉的酵母基因工程菌,其宿主主要是实验室菌株,这些酵母工程菌的酶少及产酒率都很高,但不适于酒精和酿酒行业中应用.该论文的目的是以生产菌株为宿主,构建
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目前构建的可降解淀粉的酵母基因工程菌,其宿主主要是实验室菌株,这些酵母工程菌的酶少及产酒率都很高,但不适于酒精和酿酒行业中应用.该论文的目的是以生产菌株为宿主,构建能分解淀粉和生产酒精、生产性能良好、并能于酒精和酿酒行业中应用的酿酒酵母工程菌.为进一步提高工程菌的淀粉降解水平和更适合于低pH条件下发酵,该论文通过将rDNA引入载体,通过同源重组将GAI高拷贝整合至宿主染色体,以提高工程菌分解淀粉的能力.该论文运用Southern杂交技术对构建的工程菌的整合和整合拷贝数进行检测,发现GAI基因均已整合进宿主染色体,拷贝数各不同,而且拷贝数与酶活力、产酒率不成正相关.该论文还尝试运用DNA shuffling技术,对黑曲霉葡萄糖淀粉酶基因的编码部分进行了体外定向进化改造.
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