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目的 1.建立大鼠小肠移植缺血再灌注(Ischemia/reperfusion,I/R)损伤动物模型。 2.研究小剂量他克莫司(FK506)预处理对移植肠粘膜超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)的影响。 3.研究小剂量FK506预处理对小肠I/R损伤中细胞凋亡的影响。 4.探讨其保护作用可能的分子基础。 方法 选用近交系SD大鼠建立小肠移植I/R损伤模型。实验共分3组:(1)虚假手术组,18只(2)缺血再灌注组,2×18只;(3)FK506预处理组,2×18只;每组进一步分为再灌注后0.5h 6h 24h三个亚组。FK506预处理方式为大鼠浅麻醉后按0.3mg/kg剂量通过尾静脉注射,自然环境恢复6小时后行异位节段性小肠移植术。控制冷缺血时间2.5h,热缺血时间10min。取移植肠标本行组织病理学检查;检测移植肠粘膜SOD、MDA、LDH活性;免疫荧光细胞化学方法检测移植肠凋亡细胞;免疫组化方法测定移植肠中热休克蛋白70(HSP70)表达。 结果 1.预处理组I/R损伤引起小肠粘膜病理形态学改变较I/R组轻微。 2.I/R损伤引起小肠粘膜SOD、MDA、LDH发生变化;预处理组再灌注 第四军医大学硕士学位论文后 6h、24h移植肠粘膜 SOD值高于 I八组(KO.of);再港注后 6h,MDA值低于I八组(KO.01);预处理组各时相点u-l活性均显著低于I八组 (RO.of)。 3.1川损伤造成小肠粘膜细胞凋亡增加;小剂量FK506预处理可有效减少I八损伤引起的细胞凋亡,各时相点荧光强度与1八{组相比,(R 0.0 5,RO.of)。 4.I八组再灌注后24h可见有少量HSP70表达;预处理组再灌注后0.sh即可见有少量HSP70表达,6h时表达增多,再灌注后 24h,IJSP70表达至高峰。 结 论 1.小剂量他克莫司预处理明显减轻I八引起的小肠粘膜病理形态学损害。 2.小剂量他克莫司预处理有效减轻I八损伤引起的SOD、MDA、LDH改变。 3.I八损伤可以诱导小肠粘膜细胞发生凋亡,小剂量他克莫司预处理可有效减少I八引起的细胞凋亡。 4.小剂量他克莫司预处理对大鼠小肠移植缺血再灌注损伤具有明确的保护作用,这种保护作用与热休克蛋白70的诱导有关。