大豆球蛋白碱性肽(GBAP)是从大豆球蛋白中分离纯化后所得到的一种具有抗菌能力的碱性多肽;乳酸链球菌素(Nisin)是由乳酸链球菌(Lactococcus lactis)分泌的一种对人体无毒害作用的多肽类抗菌素。本课题对两种天然抗菌剂对单增李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)的协同抑菌作用及机制进行了研究。结果如下:(1)GBAP和Nisin对单增李斯特氏菌具有良好的抑制效果,GBAP对单增李斯特氏菌的最小抑菌浓度为0.2 mg/m L,Nisin对单增李斯特氏菌的最小抑菌浓度为0.5 mg/m L。GBAP和Nisin联用对单增李斯特氏菌表现出协同抑菌效果,0.05mg/m L GBAP和0.0625 mg/m L Nisin复配使用即可有效抑制单增李斯特氏菌的生长。抑菌动力学实验表明,GBAP和Nisin对单增李斯特氏菌的抑菌方式不同,两者联用一定程度上弥补了各自功能上的不足。(2)Nisin对单增李斯特氏菌细胞膜和细胞形态具有极强的破坏作用,导致单增李斯特氏菌细胞膜明显去极化,胞内物质大量外泄。GBAP对单增李斯特氏菌细胞膜和细胞形态的影响则较小。但GBAP处理导致单增李斯特氏菌细胞质发生聚集,可能对胞内物质产生影响。GBAP+Nisin联用的作用则同时导致细胞膜的损伤和胞质的聚集。(3)GBAP对单增李斯特氏菌蛋白和DNA的合成过程产生明显的干扰,Nisin则仅对蛋白合成发挥一定的作用。GBAP通过作用于EMP途径干扰单增李斯特氏菌的呼吸代谢,同时对EMP途径关键酶产生抑制。Nisin对胞膜的损伤可能使呼吸代谢原料泄露,进而对呼吸代谢产生抑制,但并未通过作用于相关途径。GBAP+Nisin联用增强了对代谢的抑制,Nisin对胞膜的损伤可能是GBAP更好进入细胞,作用于胞内物质。(4)GBAP通过抑制了编码单增李斯特氏菌EMP呼吸代谢途径关键酶的基因的表达,进而抑制关键酶活。GBAP和Nisin均对单增李斯特氏菌细胞周期调节相关的基因具有不同程度的扰乱作用,导致单增李斯特氏菌的异常生长,Nisin通过对相关基因表达的抑制阻碍细胞壁的合成。此外,GABP抑制了单增李斯特氏菌RNA转录和翻译阶段相关基因的表达,对单增李斯特氏菌的转录和蛋白合成的延伸产生干扰,是导致蛋白片段化的主要原因。Nisin对这些基因的干扰则较弱。GBAP和Nisin联用时,Nisin对单增李斯特氏菌的细胞膜的损伤使GBAP更好的进入胞内,作用于胞内物质发挥其抑菌作用,增强了对单增李斯特氏菌的抑制效果