母丁香质量标准研究

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目的:从丁香的果实中提取分离并经光谱学鉴定得到特征性的化学成分,建立专属性较强的中药母丁香的质量标准,为控制母丁香的质量提供参考依据。母丁香为桃金娘科植物丁香Syzygium aromaticum (L.)Merr. et Perry的干燥近成熟果实。性温;味辛,归脾、胃、肺、肾经。具有温中降逆,补肾助阳等功效。用于脾胃虚寒,呃逆呕吐,食少吐泻,心腹冷痛,肾虚阳痿。主产于坦桑尼亚、斯里兰卡、马达加斯加、印度尼西亚等地,我国海南、广东、广西等省、自治区亦有栽培,是著名的香料和常用中药。查阅中医药典籍可知,母丁香与丁香功效相近,亦有不同之处。母丁香始载于《雷公炮炙论》,凡使(丁香),有雌、雄。雄颗小,雌颗大,似圆枣核。方中多使雌,力大,煎膏中用雄。《本草拾遗》:鸡舌香与丁香同种,花实丛生,其中心最大者为鸡舌,击破有顺理,而解为两向,为鸡舌,故名,乃是母丁香也。说明丁香有公丁香与母丁香之分,公丁香系花蕾,个小;母丁香系果实,个大,子叶形如鸡舌。《本草纲目》木部第三十四卷木之一“丁香”项下记载京下老医言:鸡舌与丁香同种,其中最大者为鸡舌,即母丁香,疗口臭最良,治气亦效。可见,母丁香与丁香虽来源于同一植物,但由于药用部位不同(一个是果实,一个是花蕾),功效也不尽相同。现行标准《中华人民共和国药典》2010年版一部母丁香药材收载有性状,显微特征,丁香酚的薄层色谱,水分,总灰分,浸出物,丁香酚的含量测定项,质量控制的指标比较单一,而且薄层色谱鉴别和含量测定项与丁香的控制指标一致,缺乏专属性。所以我们有必要对母丁香进行化学成分分析,制订切实可行的母丁香药材专属的质量标准。方法:据文献报道母丁香主要含有挥发油类成分,此外还有少量的苯丙素类、黄酮类、三萜类成分等。本研究对母丁香甲醇提取物的石油醚萃取部位进行系统成分分离。采用硅胶柱层析和ODS柱层析方法,TLC检测,得到2个化学成分,分别为丁香酚和母丁香酚。母丁香酚按照对照品的技术要求,分别采用薄层色谱法及高效液相色谱法检定其纯度,并通过波谱数据及理化常数鉴定其结构,为其作为质控对照品提供研究资料。采用薄层色谱法,建立以母丁香对照药材及母丁香酚、丁香酚对照品为对照的薄层色谱鉴别;采用HPLC法测定母丁香中丁香酚与母丁香酚的含量;采用GC法对母丁香的挥发油进行指纹图谱和特征图谱研究,并与丁香的GC图谱进行了比较,两者有明显区别。采用Agilent MassHunter Qualitative AnalysisB.06.00质谱工作站,检索NIST MS Search 2.0质谱库,结合文献,对气相色谱分析中的7个组分进行结构确定,计算出各组分的相对含量。此外,采用电感耦合等离子体质谱法测定了10批样品中铅、镉、砷、汞、铜的量和柱后衍生法检测10批样品中黄曲霉毒素的含量,为母丁香药材的安全应用提供参考依据。另外,对现行标准的其他项目进行复核分析,验证原方法的合理性。成果:从母丁香中提取分离纯化得到母丁香酚对照品:完善母丁香的薄层色谱,增加了以母丁香酚为对照的薄层色谱鉴别;增加了母丁香酚含量测定,同时控制了母丁香药材中丁香酚与母丁香酚的含量;首次建立了母丁香GC特征图谱,共得到7个共有色谱峰,分别为α-荜澄茄油烯(.alpha.-Cubebene)、古巴烯(Copaene)、石竹烯(Caryophyllene)、榄香烯Cyclohexane,1-ethenyl-1-methyl-2-(1-methylethenyl)-4-(1-methylethylidene)、 Naphthalene,1,2,3,5,6,8a-hexahydro-4,7-dimethyl-1-(1-methylethyl)-,(1S-cis)、丁香酚(Eugenol)、母丁香酚(2-hydroxy-4,6- dimethoxy-5-methylacetophenone),并对收集的样品进行了相似度分析和特征性分析,结果相似度在0.98以上,以丁香酚为参照物,各峰的相对保留时间应在规定值的±5%之内,规定值为0.45(峰1)、0.48(峰2)、0.57(峰3)、0.63(峰4)、0.71(峰5)、1.00(峰6)、1.15(峰7),峰7与峰6(S)的比值大于0.1。另外,首次对母丁香药材进行5种重金属及有害元素和黄曲霉毒素检查,为母丁香的安全性提供参考依据。此外,对母丁香原标准中浸出物项进行复核,结果浸出物制定不合理,建议新标准删去此项。结论:本论文通过系统的研究,建立了母丁香的质量标准,包括性状、显微鉴别、薄层色谱鉴别、含量测定、指纹图谱等,为能有效地控制母丁香的质量提供依据。
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