论文部分内容阅读
骨碎补是一种我国的传统中药,主要用于续伤止痛、补肾强骨。本文以骨碎补药材为对象,通过建立指纹图谱轮廓对药材的快速鉴别与质量控制进行研究。论文的主要研究内容如下:第一部分重点介绍了传统中药骨碎补的主要化学成分信息及其现代药理研究,同时对中药炮制的目的、炮制前后化学成分的变化进行了概述。同时还对敞开式质谱在化学合成药物和中草药质量控制中的应用进行了介绍。第二部分采用高效液相色谱法建立骨碎补液相指纹图谱,并通过液质联用对骨碎补中的主要化学成分信息进行确证,指认出了 11个化学成分,并对骨碎补中主要化学成分柚皮苷、新北美圣草苷柚皮苷与新北美圣草苷二级质谱碎片进行归属,两个化合物具有相似的结构在黄酮苷元处发生RDA裂解,都会产生[M-H-120]-的特征碎片离子。本文对骨碎补超声提取过程中提取时间、提取溶剂进行优化,以达到最优的提取效果及节约实验时间。通过建立骨碎补指纹图谱轮廓结合统计学分析软件,对比真品与伪品中的化学成分信息差异,多批次药材相似度分析中正品骨碎补的相似度均大于0.75,伪品低于0.4,在主成分分析中PC1、PC2得分达到88.6%,药材被分成了明显的两组,能准确的对多批次药材进行真伪鉴别。第三部分采用了纸喷雾敞开式质谱建立骨碎补指纹图谱轮廓结合统计学分析软件,对骨碎补快速真伪鉴别及质量控制进行研究。本章以药材中的三种含量最高的活性成分柚皮苷、新北美苷和4-O-β-D-葡萄糖基反式咖啡酸的响应为指标对喷雾电压、锥孔电压以及正负离子响应进行优化以达到最好的实验效果。对药材质谱响应稳定性进行考察,日内精密度RSD不超过5.28%,日间精密度RSD小于7.27%。在负离子模式下,骨碎补正品药材中m/z 191、341、377、579、595、615、631响应较好,伪品中m/z 191、341、371、533、609等有较好的响应,4-O-β-D-葡萄糖基反式咖啡酸的峰(m/z341)在伪品中也有显示,指标性成分柚皮苷的峰以及活性成分新北美圣草苷均未检出,在主成分分析中m/z 579、595、615、631四组峰贡献最大,真伪品分成了两组。骨碎补药材纸喷雾敞开式质谱分析法大大缩短了分析的时间、操作简便、有机溶剂使用量少,达到了快速、准确鉴别药材的目的,有望用于大批量的药材快速鉴别。第四部分比较分析骨碎补生品、微波炮制品以及砂烫品炮制前后化学成分信息的变化情况。通过液相色谱、纸喷雾敞开式质谱、液质联用三种方法的比较发现,相比生品,骨碎补经过微波炮制及砂烫炮制后易产生5-羟甲基糠醛的刺激性成分,需要合理控制炮制的温度。炮制后,主要活性成分4-O-β-D-葡萄糖基反式咖啡酸、新北美圣草苷、柚皮苷的溶出率均提高,砂烫炮制比微波炮制的效果更好,三种成分最低分别为12.54%、10.97%和8.16%。纸喷雾敞开式质谱轮廓结合统计学主成分分析,骨碎补生品与砂烫品被分成两组,说明骨碎补经过砂烫炮制工艺后化学成分信息发生了变化,炮制起到了增强药效的作用,宜炮制后入药。