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目的:研究丹红注射液对大鼠脑组织中MMP-9与RhoA因子表达的影响,并探讨丹红注射液对脑缺血再灌注损伤大鼠神经的修复及保护作用。 方法:采用线栓法制作改良的Zea-Longa法大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,首次实验设假手术组、模型组、丹参多酚酸组、红花黄色素组、尼莫地平组、丹红组。线栓阻塞大脑中动脉1.5h后拔出,再灌注3小时后尾静脉注射给药。神经功能评分及激光多普勒血流仪评价造模效果,符合入组标准的大鼠随机分为假手术组、模型组、丹参多酚酸组、红花黄色素、尼莫地平组、丹红组。假手术组及模型组尾静脉按等体积注射生理盐水,药物治疗组分别按4mg/kg、9mg/kg、0.4mg/kg、3ml/kg尾静脉注射。实验各组每日1次尾静脉给药,1周后取材。HE染色观察病理形态学的变化;尼氏染色光镜检测尼氏小体表达量作为细胞活性的评判;免疫组化以及酶联免疫吸附法检测各组左侧皮质区MMP-9、RhoA因子表达情况。 结果:⑴大鼠神经功能评分结果:与假手术组比较,模型组得分显著增高(P<0.05);与模型组比较,丹红组及其它各治疗组显著降低(P<0.05),大鼠神经功能明显改善;与其它各治疗组比较,丹红组显著降低(P<0.05)。⑵HE病理染色:假手术组胞膜完整,核清晰。模型组出现明显细胞水肿、脱失,各治疗组大鼠病理组织结构得到了不同程度的改善,其中丹红组的脑组织结构改善最为明显,梗死神经元细胞数目较假手术组轻微减少,胞膜完整,核清晰可见,坏死程度减轻,神经细胞的病变有不同程度改变。⑶尼氏染色:假手术组大鼠左侧脑皮质细胞尼氏小体显示最多,模型组大鼠左侧脑皮质细胞尼氏小体则明显减少。其他各治疗组大鼠尼氏小体表达量均明显高于模型组,以丹红组最高,提示丹红较之其他各治疗组更有利于细胞活性的保护。⑷免疫组化:与假手术组比较,模型组大鼠左脑组织MMP-9表达高于假手术组;与模型组比较,各组各治疗组MMP-9明显降低(P<0.05);丹红组与各组比较,MMP-9表达低于其它各治疗组(P<0.05);与假手术组比较,脑缺血再灌注模型组大鼠左脑组织RhoA表达最高(P<0.05);与模型组比较,各组RhoA表达均低于模型组;丹红组RhoA表达高于其它各治疗组及假手术组(P<0.05);⑸酶联免疫吸附测定法:与假手术组比较,模型组血清MMP-9含量明显高于假手术组;与模型组比较,各治疗组MMP-9明显下降(P<0.05);丹红组与各组比较,丹红组血清MMP-9含量低于其它各治疗组及模型组(P<0.05);与假手术组比较,模型组左侧脑皮质组织匀浆RhoA含量高于其它各组(P<0.05);与模型组比较,各组RhoA表达均低于模型组;丹红组高于其它各治疗组及假手术组(P<0.05)。 结论:①丹红注射液能改善脑缺血再灌注大鼠的神经功能缺损状况及脑组织的病理结构。②丹红注射液可增加大鼠脑皮质细胞尼氏小体表达量,对细胞具有保护作用。③免疫组化及Elisa显示丹红注射液通过提高RhoA表达和降低MMP-9的表达,抑制大鼠脑缺血再灌注的损伤,起到脑保护作用。丹红注射液与其他药物比较其对于脑缺血再灌注大鼠疗效最佳,为临床治疗及预防脑缺血再灌注损伤提供了实验依据。