小麦TaSOC1-like基因的分离及功能研究

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小麦(Triticum aestivum L.)是世界上三大粮食作物之一。其抽穗时间会直接影响小麦产量。为理解小麦开花过程的分子调控机理,本研究从小麦中分离得到一个MADS-box基因,命名为SOC1-like,并对其表达模式及生物学功能进行了初步探究。主要结果如下:TaSOC1-like基因具有三个等位基因,分别定位于6A、6B和6D染色体。三个基因组基因结构皆含有六个外显子和五个内含子,其核苷酸之间的序列同一性高达97.08%。基因组序列全长分别是6739 bp(TaSOC1-like-6A)、7205 bp(TaSOC1-like-6B)和7029bp(TaSOC1-like-6D),相应的CDS长度为789 bp、777 bp、780 bp,分别编码262、258和259个氨基酸。NCBI数据库蛋白预测推断显示,TaSOC1-like蛋白属于典型的MIKC型蛋白,含有MADS-box家族中MEF2-like和K-box两个经典结构域。进化树分析表明,TaSOC1-like蛋白与其他物种中同源蛋白相比,与大麦HORVU6Hr1G002330编码的蛋白相似性最高,具有较近的亲缘关系。亚细胞定位结果显示TaSOC1-like蛋白定位于细胞核中。为了研究该基因的表达模式,我们进行了qRT-PCR实验与原位杂交实验。qRT-PCR结果显示,TaSOC1-like基因在营养生长与生殖生长阶段多个组织中都有表达,其中,在二棱期茎尖中的表达量最高。原位杂交实验结果显示,TaSOC1-like基因在营养期、二棱期和小穗期等小麦穗发育各个过程均有表达,推断该基因参与小麦开花过程的调控。为了进一步研究TaSOC1-like的功能,我们利用RNAi技术降低TaSOC1-like基因在小麦中的表达量,进行了小麦的遗传转化实验,获得19棵TaSOC1-like-RNAi阳性株系。与对照植株相比,转基因小麦在生长室长日照条件下抽穗提前6-7天,在田间自然条件下早抽穗5-6天。对小麦各个发育时期的苗端进行解剖观察发现,转基因小麦的苗端发育各个时期比对照小麦苗端发育各个时期均要提前。这些结果初步表明TaSOC1-like基因对小麦的抽穗过程可能具有调控作用。观察网室栽培条件下的转基因小麦表型可发现,TaSOC1-like转基因小麦其他一些农艺性状也发生了改变,转基因株系的分蘖数与对照植株相比显著地减少,同时株高略有升高。综合以上所述,TaSOC1-like可能调控了小麦的开花过程,从而影响小麦的生成长发育过程。本研究结论可为小麦抽穗发生的分子机理提供重要数据。
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