论文部分内容阅读
从湖南官地坪和浏阳烟科所烟田各采集5个烟草根际土壤样品。分别采用脱脂奶粉培养基和几丁质培养基,系列稀释涂布平板法筛选蛋白酶产生菌和几丁质酶产生菌；采用氨化细菌培养基,石蕊试剂变色法筛选氨化细菌。经反复纯化验证,共得到在脱脂奶粉培养基上能够稳定产生透明圈的细菌25株；得到在几丁质培养基上能够产生稳定透明圈的细菌5株；得到氨化细菌6株。对上述菌株进行了16S rR NA鉴定,得到鉴定结果为PR1同温层芽孢杆菌(Bacillus stratosphericus)、PR2荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)、PR3高地芽孢杆菌(B. altitudinis)、PR4嗜线虫沙雷氏菌(Serratia nematodiphila)、PR5副溶血性弧菌(Vibrio patahaemolyticus)、PR10同温层芽孢杆菌(B. stratosphericus)、HYC1粘质沙雷氏菌(S. marcescens)、HYC2气单胞菌属(Aeromonas)、 HY C3嗜线虫沙雷氏菌(S. nematodiphila)、HYC4荧光假单胞菌(P.fluorescens)、HYC5甲基营养芽孢杆菌(B. methylotrophicus)、HN1假单胞菌(Pseudomonas)、HN2嗜线虫沙雷氏菌(S. nematodiphild)、H N3深红沙雷氏菌(S. rubidaea)、HN4甲基营养芽孢杆菌(B. methylotrophicus)、HN5解淀粉芽孢杆菌(B. vallismortis)、HN6同温层芽孢杆菌(B. stratosphericus)。进一步测定了上述菌株的解磷、解钾以及产生植物激素能力。以上菌株各项功能综合分析结果表明,同温层芽孢杆菌(B. stratosphericus) PR1、同温层芽孢杆菌(B.stratosphericus) PR10、阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)JP6、阴沟肠杆菌(E. cloacae) JP9沙福芽孢杆菌(B. safensis) JX9具有较好的植物促生潜力。对具有促生潜力的PR1、PR10、JP6、JP9、J. K9菌株进行了培养基的优化。以豆芽汁培养基为基础培养基,通过单因素试验确定各菌株的适合碳源、氮源、无机盐种类。单因素试验中所用碳源为玉米粉、可溶性淀粉、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖；有机氮源为豆饼粉、蛋白胨、酵母膏；无机氮源为尿素、(NH4)2SO4、NH4NO3、NH4CI;无机盐为K2HPO4、KH2PO4、MgSO4、CaCO3。然后通过正交试验得到每株菌的最优培养基。得到PRl的最优培养基为：1.5%蔗糖、0.5%玉米粉、2.5%豆饼粉、0.3%尿素、0.3%K2HPO4。PR10的最优培养基为：2%葡萄糖、3%豆饼粉、0.3% NH4NO3、0.3% MgSO4。JP6的最优培养基为：1.5%葡萄糖、2%豆饼粉、0.5% NH4Cl、0.5% CaCO3。JP9的最优培养基为：1.5%葡萄糖、3%豆饼粉、0.1%NH4Cl、0.1%CaCO3。JX9的最优培养基为：1.5%玉米粉、3%豆饼粉、0.5%NH4Cl、0.5 CaCO3。用优化的培养基培养48h后,通过菌落计数试验得到PR1菌落数由3.02×108CFU/g增加至8.86×109CFU/g; PR10菌落数由1.11×108CFU/g增加至183×108CFU/g; JP6菌落数由5.92×108CFU/g增加至755×109CFU/g; JP9菌落数由4.85×108CFU/g增加至7.58×109CFU/g; JX9菌落数由309×108CFU/g增加至525×109CFU/g。