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本研究采用两种不同的植物:海芋(Alocasia macrorrhiza(Linn.)Schott)和银含(Ginkgo bilobaL.)叶作为主材料,分别取海芋的地上部分、地下部分和银杏叶的鲜样做初步对比试验,采用不同浓度梯度溶液用水浸的方式进行灭螺效果的比较,实验结果显示:同一种材料,随浓度升高,钉螺死亡率越大,如银杏叶用水浸液浓度为0.05,0.1,0.5,1g/L处理2天后,钉螺死亡率为30%、40%,50%、60%;同一浓度下,海芋的地下部分的灭螺效果最好,其次,海芋的地上部分,银杏叶最差,在浓度为0.5g/L时,用水浸液处理4天,海芋的地下部分的灭螺率为100%,海芋的地上部分为80%。
为进一步分析两种植物的活性成分,我们用有机溶剂乙醇和正己烷分别提取出海芋地上部分和地下部分、银杏叶的干样,并对提取的活性成分做灭螺效果对比实验:结果显示:同一浓度下:用正已烷提取海芋的地下部分物质灭螺效果最佳,40mg/L正已烷提取物处理4天,钉螺死亡率达到100%。
采用硫酸铵分级沉淀提取海芋块茎组织匀浆液中的凝集素,用鱼血检测经浓度梯度粗提的凝集素的活性,然后取每一浓度梯度下提取的凝集素各三份配成1g/L、0.5g/L、0.25g/L的溶液,同时用蒸馏水和0.1g/L的氯硝柳胺作对照组,进行灭螺实验,最后通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分析钉螺体内酯酶同工酶的变化情况,并以此来判断凝集素对钉螺的生理生化的影响。结果:收集的不同组提取物中,30%、60%、90%的硫酸铵浓度下的提取物凝血程度逐渐减弱,灭螺效果逐渐降低;0%的硫酸铵浓度下的提取物几乎没有凝血现象,而且灭螺效果较差,说明凝集素的收集主要集中在30%的硫酸铵浓度下.通过对酯酶同工酶(EST)电泳图谱的分析,低浓度凝集素处理钉螺,刺激EST的表达,增强了钉螺的肝脏解毒能力;高浓度凝集素处理钉螺,其药物作用强度超过钉螺生理阈限,其体内物质和能量代谢出现紊乱,从而抑制酶的合成;在接近死亡的机体中,酯酶的合成几乎停止。
结论::海芋凝集素有一定的灭螺效果,并且对钉螺的生理特征有相当大的影响。