【摘 要】
：
纳米技术是以纳米尺度的产物为对象，几年来迅猛发展的一项新技术。目前日益增长的研究热点立足于纳米科技在工程和医药领域内的巨大潜力，纳米粒子广泛应用于药物载体、细胞分离纯化、组织修复、磁共振造影剂、肿瘤热疗等方面。于此同时，纳米粒子的毒性及毒作用机制也日益引起人们的关注。量子点是一种粒径小于或接近激子波尔半径的半导体纳米颗粒，在激发光照射下会发射荧光。相对传统有机荧光试剂，量子点在荧光强度、光稳定性等
论文部分内容阅读
纳米技术是以纳米尺度的产物为对象，几年来迅猛发展的一项新技术。目前日益增长的研究热点立足于纳米科技在工程和医药领域内的巨大潜力，纳米粒子广泛应用于药物载体、细胞分离纯化、组织修复、磁共振造影剂、肿瘤热疗等方面。于此同时，纳米粒子的毒性及毒作用机制也日益引起人们的关注。
量子点是一种粒径小于或接近激子波尔半径的半导体纳米颗粒，在激发光照射下会发射荧光。相对传统有机荧光试剂，量子点在荧光强度、光稳定性等方面具有无可比拟的优越性。将量子点与生物大分子偶联可代替传统的荧光染料分子，作为荧光探针广泛应用于生物分子、细胞以及活体标记。
为了进一步加深对Fe2O3纳米粒子毒性和毒作用机制的认识，本课题是以磁性Fe2O3纳米粒子对体外培养人肝癌细胞株HepG2染毒，进行细胞增殖及形态学检测，并通过DNA凝胶电泳、线粒体膜电位检测、Annexin-V/PI法检测细胞凋亡率、细胞内活性氧水平、WesternBlot法检测p53和caspase-3蛋白表达的方法探讨Fe2O3纳米粒子对于细胞增殖的影响以及其诱导凋亡的可能机制。同时，本课题以链霉亲和素-生物素结合的CdSe/ZnS量子点为荧光探针，对HepG2细胞磷脂酰丝氨酸以及Bcl-2和Bax蛋白的表达进行了检测，并与传统FITC探针进行了比较。从而评价了量子点作为荧光探针在毒理学检测中的应用价值，并进一步探讨Fe2O3纳米粒子诱导HepG2细胞凋亡的途径。试验结果表明：
1、在本试验条件下，Fe2O3纳米粒子对体外培养HepG2细胞有生长抑制作用，并能够引起HepG2细胞培养介质中LDH水平显著升高，膜通透性增加。Hoechst荧光染色后，染毒细胞的细胞核呈现凋亡形态。提示Fe2O3纳米粒子可影响HepG2细胞增殖。
2、在本试验条件下，Fe2O3纳米粒子可使HepG2细胞DNA发生有规律的断裂，细胞凋亡率显著增加，细胞线粒体膜电位的下降，细胞内活性氧增加，p53和caspase-3蛋白的表达量增加，提示Fe2O3纳米粒子诱导HepG2细胞发生凋亡。
3、在本试验条件下，Fe2O3纳米粒子可使细胞膜表面出现明显PS蛋白外翻现象，细胞内Bcl-2表达下调，而细胞内Bax表达上调，Bcl-2/Bax比率逐步下降。提示Fe2O3纳米粒子诱导细胞凋亡与Bcl-2/Bax途径有关。
4、用量子点荧光标记的荧光图像较传统荧光染料具有荧光强度强，检测灵敏度高等优点，且具有较强的抗光漂白性能综上所述，我们可以初步认为：Fe2O3纳米粒子可抑制人肝癌细胞HepG2的增殖，诱导细胞发生亚细胞水平的形态学变化，引起细胞膜通透性增加、线粒体膜电位下降、细胞内活性氧增加，导致细胞DNA断裂、凋亡率增加，Fe2O3纳米粒子诱导HepG2细胞凋亡的机制与p53和Caspase-3蛋白表达上调有关，可能通过Bcl-2/Bax途径最终导致细胞死亡。量子点荧光标记在毒理学检测中具有较大的发展潜力。
其他文献
大蒜是亚洲国家且在中国都是有着上千年使用历史的调味品，它除腥杀菌的能力以及较高的营养价值深受中国家庭的喜爱。富硒大蒜是近些年才出现的高营养价值的大蒜，本研究旨在将大蒜进行富硒发芽，对富硒发芽后的大蒜中的营养物质、抗氧化活性以及对AGEs的抑制能力与富硒大蒜等进行比较，探究富硒发芽大蒜的优势以及应用前景，主要的研究内容以及结论如下： 1)首先从亚硒酸钠浓度、温度、湿度三个条件优化了大蒜富硒发芽培养
目的：三伏贴以“冬病夏治”为指导理论，结合现代经皮给药系统原理，于三伏时节，贴敷于相应穴位，治疗呼吸道疾病、增强体质，且临床疗效良好。但传统三伏贴需临用前配制，不利于工业化生产。因此，为满足现代临床需求，本课题将其研制成外用分散片，首先对制剂所需辅料种类和用量进行筛选并优化，以建立三伏贴外用分散片的制备工艺；为保证制剂质量稳定、可控，利用薄层色谱法和高效液相色谱等方法，建立三伏贴外用分散片的质量标
四川泡菜是中国发酵蔬菜的典型代表，被誉为“川菜之骨”，然而抗生素的滥用导致发酵蔬菜原料中抗生素抗性污染加剧，进一步为四川泡菜的食品安全提出了严峻的挑战。为此，本论文以四川泡菜为研究对象，通过构建文库探索其中细菌的多样性，运用荧光定量技术检测样品中抗生素抗性基因的含量，以期为发酵蔬菜的安全保障提供一定的参考。 通过构建16SrRNA基因文库共筛选到130个克隆子，用稀释度曲线评估基因文库发现泡菜中
金针菇菌丝体相对于金针菇子实体，不管是在药用效果，还是在生物活性物质方面，前者都明显优于后者，而金针菇多糖又是其药用效果和生物活性的主要成分之一。本文主要从金针菇发酵条件的优化，菌丝体多糖的提取工艺优化和金针菇菌株的诱变来选育高产菌丝体多糖菌株，期望为国内金针菇菌丝体多糖类药用品和保健品的开发作出贡献。 金针菇高产菌丝体菌株的初筛及发酵工艺条件优化的试验中，首先从四株备选金针菇菌株中筛选出了3号
四川泡菜在每年发酵和储藏阶段发生腐败的数量占总产量的5~7%，防治腐败发生是四川泡菜产业迫切需要解决的问题。目前对四川泡菜的腐败研究主要集中在单个腐败微生物的分离鉴定，而四川泡菜环境是一个复杂的微生物体系，腐败由多种微生物共同参与。鉴于此，本文筛选具有典型腐败特征的腐败微生物，并将腐败微生物与四川泡菜中的优势菌植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)进行共培养，研究植物乳杆菌与
番茄在世界范围广泛种植，现已为全世界年总产量最高的30种作物之一。番茄内含有丰富的番茄红素、胡萝卜素、维生素C和B等，尤其是维生素P的含量为蔬菜之冠，经常食用不仅可以为人们提供多种天然的维生素、矿物元素和纤维素，而且对强身健体、防病治病亦有一定的作用。目前，番茄从采摘、运输到加工的时间差较长，不仅使番茄制品霉菌含量超标，品质难以保证，而且为企业和果农带来较人的经济损失。因此，在适应有机蔬菜生产要求
无核白葡萄（VitisviniferaL.cvThompsonSeedless）是新疆特色葡萄品种之一。黑曲霉（Aspergillusniger）引起的黑霉病是葡萄常见的采后病害，贮期易导致葡萄果实腐烂变质。研究表明硫化氢（H2S）作为信号分子能够增强植物抗菌性。本文以无核白葡萄为试材，采用500μL/LH2S熏蒸葡萄果实并损伤接种黑曲霉，研究H2S处理对葡萄采后贮藏品质、细胞壁代谢、抗病相关酶及
腐马素(fumonisins)是由串珠镰刀菌和再誉镰刀菌等镰刀菌产生的一类真菌毒素。由于其化学结构与动植物中的神经鞘氨醇类物质类似，可以引起动物各种疾病以及植物病害。一方面，腐马素对某些牲畜有急性毒性及潜在的致癌性，如引起马脑炎、猪肺水肿或大鼠肝癌，还能引起人类食道癌和神经管缺陷，由于该毒素污染广泛，在玉米、玉米制品以及芦笋等农产品中都有报道，严重威胁食品安全及人类和动物的健康；另一方面，腐马素可
针对宁夏灌区蔬菜生产中过量施用氮肥的问题，采用田间试验、室内分析和生物统计相结合的方法，以空白和单施有机肥为对照，露地蔬菜选择有代表性的春小麦-白菜、芹菜-白菜两种轮作体系，研究不同水氮措施对轮作体系中氮素利用与平衡的影响；设施蔬菜以番茄-番茄-黄瓜-番茄轮作，研究滴灌条件下不同施氮量对两年蔬菜产量、氮素平衡及土壤硝态氮累积的影响；提出以控(减)氮为核心的蔬菜氮素供应目标值，主要研究结果如下：1、
目的：用不同浓度的肌醇六磷酸(Inositol Hexaphosphate，IP6)以不同时间作用于人结肠癌细胞系HT-29，观察IP6对癌细胞凋亡的影响并对其作用机制进行探讨。方法：1将不同浓度的耽(0mM、1.8mM、3.3mM、5.0mM、8.0mM、13.0mM)作用于HT-29细胞一定时间(0～6d)，通过MTT法观IP6对HT-29细胞的增殖抑制作用；2将不同浓度IP6(0mM、1.8